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Introduction : 1- Définition : 2- Principe physique du microscope

C'est la microscopie à fluorescence. Le microscope photonique utilisent un flux ondulatoire de particules (FP) non chargées les photons



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Une application pratique et manipulation. I La microscopie photonique : •. Définition : Microscope utilisant comme source lumineuse la lumière blanche.



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Aujourd'hui la microscopie est divisée en deux grands groupes différents par la nature de la particule élémentaire impliquée : le microscope optique ou 



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Observation et dénombrement du phytoplancton marin par

26 oct. 2015 Observation et dénombrement du phytoplancton marin par microscopie optique photonique ... 4 Termes et définitions .



Anatomie et fonctionnement du microscope optique}}

L'objectif de ce cours est de fournir les bases de la microscopie photonique en s'appuyant sur quelques connaissances simples en optique.



CONNAITRE LE MICROSCOPE

Le microscope est un instrument d'optique qui permet de grossir des objets jusqu'à 1500 fois. Néanmoins on ne peut observer que des objets très minces qui.



Microscope objectives - Photoniques

microscope objective as a fundamen-tal component in the laboratory is an optical component that demands continuous R&D efforts motivated by the development of new imaging and microscopy techniques as well as the specific end-users’ requirements REFERENCES [1]Wikipedia Albert Van Helden; Sven Dupré; Rob van Gent (2010)



Optics and photonics — Operation microscopes

Optics and photonics — Operation microscopes — Part 1: Requirements and test methods 1 Scope This document specifies requirements and refers to test methods for operation microscopes used for observation during surgical operation and treatment of patients It does not apply to accessories e g photographic cameras



Definitions of the Parts of the Microscope - ualbertaca

Some microscopes have an annular condenser which is a plate under the stage that can be rotated The plate consists of holes of different diameter As the plate is rotated the different holes click into place blocking out different amounts of light Other microscopes have an iris diaphragm with a lever that opens and closes the



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This is a German standard that has been adopted internationally as an optical standard used in most quality microscopes The focal tube length of a DIN standard microscope objective is 160mm A typical DIN standard microscope objective lens has 20 1mm diameter threads

What is a basic introduction to microscopy?

Introduction to Microscopy, its different types in optical and electron based microscopy. Also presentation involved working principles of Optical, SEM & TEM microscope with their components working description. All microscope deeply discussed about the contrast, application, advantages & disadvantages.

What is the meaning of the word microscope?

The word microscope is a originated from two Greek words – micros : meaning small, skopos: meaning watcher thus, microscope is a tool, which enables us to view very small objects, by magnifying the image of the small object.

What is the focal tube length of a Din microscope objective?

The focal tube length of a DIN standard microscope objective is 160mm. A typical DIN standard microscope objective lens has 20.1mm diameter threads. RMS ("Royal Microscope Society"), which had a longer tube length 170mm and 20.32mm thread. Most DIN optics are interchangeable.

What is a microscopic object?

Objects are said to be microscopic when they are too small to be seen with the unaided eye—they need to be magnified (enlarged) for the human eye to be able to see them. This includes human cells and many other types of cells that you will be studying in this class.

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1. Microscope photonique

Chapitre. 1Imagerie cellulaire

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L"étude de la structure et du fonctionnement de la cellule a nécessité la mise au pointd"outils et de techniques appropriés.Cen"est qu"au XII siècle, avec l"intervention dumicroscope, que lescellulessont devenues visibles. Par la suite, pendant plusieurs années,toutes nos connaissances sur les cellules ont été découvertes grâce à cet instrument.Lamicroscopie est un ensemble de techniques permettant d'obtenir une image des structuresbiologiques. Le principe est dans tous les cas le même : une onde est envoyée sur lapréparation ou émise par la préparation. Cette onde est captée par un objectif qui la concentreet passe par un oculaire qui crée une image observable. Cetteimage est soit observée à l'œilnu, soit photographiée,soit enregistrée par caméraet stocké sur ordinateur pour retraitement.Aujourd'hui la microscopie est divisée en deux grands groupes, différents par la nature de laparticule élémentaire impliquée :lemicroscope optique ou photonique etle microscopeélectronique.1. Microscope photoniqueUn certain nombre de microscopes ayant chacun des montages optiques spéciaux ont étémisau point. Ces dispositifs permettent d"augmenter considérablement la qualité desobservations.Parmi ces microscopes:1.1.Microscope optique en lumière transmiseLemicroscope optique en lumière transmise permet d"étudier les cellules fixées etcolorées. Un objet éclairé en lumière transmise est examiné à traversun système optiquecomposéd"un premier système de lentilles, l"objectif, de très courte focale, et d"un deuxièmesystème de lentilles, l"oculaire, qui donne une image virtuelle de cettedernière. L"imagefinale se forme au niveau de l"œil ou d"un appareil photographique associé au microscope(Figure. 1).La puissance d"un microscope est définie par le produit du grandissement del"objectif par la puissance de l"oculaire. Son grandissement étant au maximum de 1000. Cettenotion importante doit être complétée par celle de pouvoir séparateur, qui détermine la qualitéoptique réelle de l"appareil. Celui-ci est défini comme la distance minimale séparant deuxpointsduplan objetdont lemicroscopedonnedes imagesdistinctes.Dans les meilleuresconditions, le pouvoir séparateur du microscope photonique atteint sa limite théorique, qui estcomprise entre 0,2 et 0,3?m.Il est possible de l"employer:

Chapitre. 1Imagerie cellulaire

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iEn lumière réfléchie: l"éclairage est vertical, éclairant l"objet de haut en bas; lalumière réfléchie par l"objet est transmise à l"œil de l"observateur par le système optique dumicroscope.iEn fond noir: l"éclairage est latéral, le fond de la préparation est obscur; seules lesparticules qui diffractent les rayons lumineux en direction de l"oculaire s"illuminent. Lesrayons lumineux n"atteignent pas l"objectif lorsque la préparation est dépourvue de structure.Lorsque la préparation contient des particules, la lumière est diffractée et certains rayonstraversent le système optique du microscope.

Figure.1:Principe de fonctionnement dumicroscope en lumière transmise(Jean-Claude et Roland,2005).1.2.Microscope polarisantLe microscopepolarisant est un microscope photonique ordinaire pourvu de deuxfiltres: l"un est placé entre la lumière et l"objet, l"autre dans l"oculaire. Les filtres étantcroisés, la lumière ne parvient pas à l"œil de l"observateur: mais lorsque les particules oudesstructures sont anisotropes, elles apparaissent brillantes et se détachent sur le fond sombre. Cemicroscope est surtout utilisé en cristallographie. Dans l"étude des cellules, il donne desimages de toutes structures dont les molécules sont orientées,tels les fuseaux de division

Chapitre. 1Imagerie cellulaire

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(microtubule s) , les pa ro is des cel lules végéta les (ce llulose ), l es fibres musculaires striées(myofibrilles de myosine et d"actine)...(Figure. 2)

Figure.2:Principe de fonctionnement dumicroscope polarisant(Caronet al.,2007).1.3.Microscope à contraste de phaseSon principe repose sur l"amplification des contrastes naturels en mettant à profit lesdifférences d"indices de réfraction entre les organites ; différences qu"il transformeendifférences d"intensités de lumières qui sont alors visibles à l"œil. La base de cettetransformation repose sur les interactions entre les ondes lumineuses : on parled"interférences.Ce type de microscope est largement utilisé pour l"observation decellulesvivantes, en culture(Figure. 3).

Chapitre. 1Imagerie cellulaire

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Figure.3:Comparaison des images obtenues avecun microscope photonique ordinaire (a) etunmicroscope à contrastede phase(b). Coupes transversales de tubules rénal de mammifères(Jean-Claude et Roland,2005).1.4.Microscope à fluorescenceLemicroscope à fluorescencepermet de voir les molécules qui émettent des photons delongueur d"onde déterminée après excitation par une source lumineuse.Ce microscope estsemblable à un microscope optiqueordinaire, en dehors du fait que la lumière incidente passeà travers deux jeux de filtres. Le premier filtrela lumière avant qu"elle n"atteignel"échantillon, ne laissant passer que les longueurs d"onde qui excitent le colorant fluorescentparticulier utilisé. Le second bloque cette lumière et ne laisse passer que les longueursd"ondes émises lors de la fluorescence du colorant. Les objets colorés apparaissent en couleurvive sur fond sombre(Figure. 4).1.5. Microscope confocal à balayageCe microscopeest un microscope à fluorescence dont la source lumineuse est un rayonlaser. Ce rayon est focalisé sur un plan précis à une profondeur particulière de l"échantillon, etseule la fluorescence émise par ce plan précis peut sortir du détecteur, et être incluse dansl"image. On obtient une image précise en deux dimensions du plan sur lequel la mise au pointa été faite-une coupe optique. Il est ainsi possible d"observer une cellule ou une structureplan par plan. Une série de coupe optique à différentes profondeurs permet de construire uneimage en trois dimensions(Figure. 5).

Chapitre. 1Imagerie cellulaire

7 Figure.4:Principe de fonctionnement du microscope à fluorescence(ThomasetWilliam, 2004).

Figure.5:Principe de fonctionnement dumicroscope confocal à balayage(Maillet et Lemullois, 2006).2.Microscope électroniqueLe microscope électronique est beaucoup plus récent par rapport au microscope optique.Le principe de fonctionnement d'un microscope électronique ressemble un peu à celui d'unmicroscope optique sauf qu"au lieu des photons ce microscopefonctionneavec des électronsle faisceau est produit et accéléré par un canon à électrons (cat hode e t anode percée).

Chapitre. 1Imagerie cellulaire

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Chapitre. 1Imagerie cellulaire

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11. Câble haute tension. 2. Cathode. 3.Condensateur. 4. Objet à étudier. 5. Objet à étudier. 6. Objectif.6. Projecteur. 7. Fenêtre d"observation. 8. Ecran Fluorescent. 9. Plaques photographiques.Figure.6:Principe de fonctionnement dumicroscope électronique à transmission(Maillet et Lemullois, 2006).

Figure.7:Colonie deStaophylococcus aureusobservée enmicroscope électroniqueàbalayage(Jean-Claude et Roland, 2005).

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