[PDF] TD N°1 : Méthodes de microscopie optique et électronique





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Anatomie et fonctionnement du microscope optique}} Anatomie et fonctionnement du microscope optique}}

Anatomie et fonctionnement du microscope optique. Corentin Spriet François Waharte. L'objectif de ce cours est de fournir les bases de la microscopie 



TD N°1 : Méthodes de microscopie optique et électronique TD N°1 : Méthodes de microscopie optique et électronique

- Connaitre le principe de fonctionnement du microscope optique et électronique. - Pouvoir faire la différence entre la microscopie photonique et la microscopie.



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Son fonctionnement est le suivant: l'objectif 'Ob' donne de l'objet une image réelle agrandie Cette image intermédiaire est reprise par l'oculaire 'Oc' qui en donne une image virtuelle à l'infini finalement observée par l'œil Le grossissement global du microscope est le produit du grossissement de l'oculaire par le grandissement de l



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- Une technique simple pour mesurer un angle optique ? est de fabriquer un "oeil fictif" constitué d'une lentille convergente et d'un écran placé à la distance focale de cette même lentille: - Par une méthode de votre choix placer l'objet dans le foyer objet de la première lentille



LE MICROSCOPE OPTIQUE

moyen simple et pratique de régler l'éclairage du microscope défini par August Köhler un spécialiste allemand des microscopes Cette méthode présente plusieurs avantages pratiques : 1 Reproductibilité des conditions d'observation; 2 Répartition homogène de la lumière dans le champ; 3 Exploitation maximale de l'O N de l'objectif; 4



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Fiche méthode : Utilisation d’un microscope optique Un microscope pemet d’obseve les objets invisibles à l’œil nu (micoscopiues) Etre autonome au petit objectif Savoir passer du petit au moyen objectif sans demander l’autorisation Interdiction de passer au gros objectif Niveau Objectifs attendus



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2-1 La microscopie optique Le microscope optique permet d’observer les cellules qui sont généralement des corpuscules incolores et translucides L’unité de mesure communément utilisée en microscopie est le micron ou le micromètre = 10-6m le nanomètre 1 nm = 10-9m = 10 Angströms 2-1-1 Description d’un microscope

Qu'est-ce que le microscope optique ?

Le microscope optique permet d’observer au niveau cellulaire des êtres vivants ou des échantillons fixes (coupes de tissus). Il est utilisé en science des matériaux, ainsi qu’en géologie. Les tissus sont colorés afin de les voir clairement. Les colorations de Gram sont utilisées pour déterminer si les bactéries ont été manipulées correctement.

Comment fonctionne le microscope électronique ?

L’objet est bombardé par un faisceau d’électrons. Le microscope électronique utilise des lentilles électrostatiques et des lentilles magnétiques pour former l’image. Le ME révèle l’ultrastructure des cellules eucaryotes et permet une observation plus poussée de la structure procaryote.

Quels sont les avantages d’un microscope optique ?

Elle consiste à grossir l’image optique d’un objet de petites dimensions en utilisant un microscope optique. Cet appareil utilise des lentilles optiques pour former l’image en contrôlant le faisceau lumineux et pour illuminer l’échantillon. Elle permet l’observation de la structure globale des cellules eucaryotes.

Comment utiliser un microscope ?

6ème Découvrir l’utilisation du microscope et connaître le nom des différentes parties. Régler correctement la luminosité, savoir passer du petit (rouge) au moyen objectif (jaune) avec l’autorisation du professeur. Interdiction de passer au gros objectif (bleu). Interdiction de passer au gros objectif.

TD N°1 : Méthodes de microscopie optique et électronique

Université Frères Mentouri Constantine 1 1ère année LMD/TC/SNV

Cours de Biologie Cellulaire Enseignant responsable / Dr. ZOUAGHI Youcef

Année universitaire 2020/2021 Dr. ZOUAGHI Youcef Page 1

Objectifs du cours :

- Connaitre le principe de fonctionnement du microscope optique et électronique. - Pouvoir faire la différence entre la microscopie photonique et la microscopie

électronique.

La microscopie optique(ou photonique) et la microscopie électronique.

1. Microscopes optiques (M.O)

1.1. Microscope optique à fond clair

¾ Principe

Le microscope optique à fond clair (Figure1), utilise comme source lumineuse la lumière visible. Il est équipé de trois systèmes de lentilles de verre transparentes : x Un objectif effectue le grossissement primaire et donne une image réelle.

Le pouvoir séparateur (ou de résolution) est la plus petite distance séparant deux points voisins

Figure 1 : le Microscope optique à fond clair et ses constituants [Voir la vidéo sur ce lien : https://www.youtube.com/watch?v=EujX69eCo74] TD N°1 : Méthodes de microscopie optique et électronique

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1.2.Types de microscopes optiques

Il existe plusieurs types de microscopes optiques ayant chacun des montages optiques conditions. Les microscopes les plus utilisés sont regroupés dans le tableau (1). Tableau 1 : Les différents types des microscopes optiques

Les types Utilisés pour :

après coloration. cellules vivantes et en déplacement.

3. MO à fluorescence Le marquage fluorescent de structure et de

composés macromoléculaires. réfraction et de contraste.

2. Microscopes électroniques

¾ Principe

Le principe de fonctionnement d'un microscope électronique ressemble un peu à celui d'un microscope optique sauf que: x Les photons sont remplacés par des électrons. x Les lentilles de verre sont remplacées par des lentilles électromagnétiques. x La limite de résolution du ME est plus élevée à celle du MO. Elle est de 2 nm

2.1.Microscope électronique à transmission (MET)

Le MET se compose essentiellement de:

x une source des électrons (fil métallique chauffé à un degré très élevé sous vide). Sous

vide, les électrons vont être accélérés en appliquant une différence de potentiel de10 à

100 kV

x Espace tubulaire sous vide.

x Des lentilles électromagnétiques (Bobines) permettent la diffraction du trajet des

électrons.

2.2.Microscope électronique à balayage (MEB)

IH 0(% SHUPHP G

surfaces des objets massifs après leur traitement par des substances métalliques réfléchissantes

par la surface métallique, qui sont utilisés pour fournir une image.

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3. Différence entre microscopes optiques et électroniques

Le tableau (2) résume les principales différences entre les microscopes optiques et

électroniques.

Tableau 2 : les principales différences entre MO et ME MO ME Lampe

électrique

Filament de tungstène porté à

incandescence Rayonnement photons Electrons libres accélérés dans le vide

Système optique Lentille de

verre

Lentille électromagnétique

Pouvoir séparateur 0.2µm 0.2nm (2Ä)

Grossissement 40 à 2000 500.000(MET)

Figure 2: Principe de fonctionnement du microscope optique et électronique à transmissionquotesdbs_dbs28.pdfusesText_34
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