[PDF] [PDF] Mesure de lactivité enzymatique

[PDF] Méthodes de mesure des activités enzymatiques - Remedeorg

C Méthodes cinétiques indirectes utilisant des réactions consécutives IV enzyme-substrat pour des conditions physicochimiques données (pH, tempéra- tions enzymatiques permet le dosage du produit de la première réaction dans un

[PDF] AT TSTL biotechnologies : OBÉSITÉ ET RISQUE

Comprendre comment doser un substrat par une méthode enzymatique Pour chaque dosage initiale de la réaction par la méthode cinétique et deux points

[PDF] DOSAGE DE SUBSTRAT Méthode enzymatique « en point final »

Principe général On dose le produit formé ou le substrat disparu, par méthode spectrophotométrique une fois la réaction enzymatique terminée (réaction totale)

[PDF] Travaux pratiques de cinétique enzymatique - JF Perrin

Dosage d'un analyte par méthode enzymatique en cinétique en phase On fait en sorte que les substrats autres que S soient en concentration déterminée, 

[PDF] Mesure de lactivité enzymatique

Soit par la vitesse de disparition d'un substrat 2 Soit par la vitesse Méthodes cinétiques: 1 doser la concentration et par suite la quantité d'enzyme 

[PDF] 6-Activité enzymatique

l'enzyme (concentrations des substrats, activateurs, et inhibiteurs) et par des effets si l'enzyme obéit à la cinétique Michaelis-Menten, une concentration de substrat dépassant 10 X le K m A 3 Mesure de l'activité enzymatique par méthodes discontinues s'il est impossible de doser le produit en présence du substrat

[PDF] 36 Cinétique enzymatique - ESI

la vitesse d'une réaction de la formation d'un complexe enzyme- substrat: E + S E·S Il y a quatre méthodes graphiques pour établir les valeurs de Km et Vmax

[PDF] TRAVAUX PRATIQUES de BIOCHIMIE

les dosages de SUBSTRAT par méthode enzymatique en point final ; sur la cinétique d'une réaction chimique en augmentant la vitesse de réaction

[PDF] éduSCOL - mediaeduscoleducationfr - Ministère de lÉducation

catalytique Enzymologie appliquée Dosage de substrats par méthode en point final Cette partie sera traitée en lien fort avec l'étude cinétique des enzymes

[PDF] Modélisation cinétique de lhydrolyse enzymatique des substrats

17 mar 2012 · Modélisation cinétique de l'hydrolyse enzymatique des substrats cellulosiques In - Méthode 1: Dosage du glucose, xylose et cellobiose 55

[PDF] dosage des ions calcium et magnésium correction

[PDF] dosage des ions calcium et magnésium par l'edta corrigé

[PDF] dosage des ions ferreux par le permanganate

[PDF] dosage des salicylés dans l'urine

[PDF] dosage des salicylés dans le sang

[PDF] dosage des triglycérides sériques par méthode enzymatique

[PDF] dosage du cholestérol total

[PDF] dosage du mélange naoh et na2co3

[PDF] dosage du mélange naoh na2co3 par hcl

[PDF] dosage dureté de l'eau

[PDF] dosage en point final définition

[PDF] dosage enzymatique de substrat en point final

[PDF] dosage ethanol dans le vin

[PDF] dosage ethanol dichromate

[PDF] dosage fe2+ par cr2o72-

enzymatique

DR AKSAS

1

ƒIl

2

Cette mesure consiste à évaluer la

3

L'actiǀitĠ d'une enzyme se mesure

1.d'un

d'apparition d'un

3.d'utilisation d'un

4

Méthodes de mesure

2 Méthode en point final ou " à deux points »

Méthodes cinétiques:

1. 5 Si expérimentales[S]0 et[S]0 la d'enzyme C'est doser d'enzyme 6

Conditions opératoires

et maximale a)0et déterminer contient. b) optimale c) [S]( activateurs 7

Le substrat

Le Pour Pour Il doitMais Un de on exige que S > 10 Km. 8

Température

En , C

SFBC(société

C 9

La durée de la mesure

AE = Vi en [ ] saturante de substrat

10 10

Le Témoin

Dans les méthodes " 2 points »

On Ce que .

Dans les méthodes cinétiques

On 11

Les unités enzymatiques

katalquantité seconde trop-

Launité

internationalequi catalyse minute 60
12

Les unités enzymatiques

Nombre

AEM

Nombre

AS

Elle enzymatique

13

Les unités enzymatiques

ƒLe=

/ Activité enzymatique totale de départ (x

ƒ Le=

spécifique de départ 14 1 manuelle 1. durée, 2.son 3.

Į .15

Méthode en point final ou à " 2 points »

Ladoit

Le lorsque nécessaire

¾soit

¾soit

zone0en

¾soit.

16

Méthode en point final ou à " 2 points »

Faire Ce (Exemple transformer 17

Méthode en point final ou à " 2 points »

Exemple:

LetĮ-;

-30. -Dinitro 18 ALAT

Méthode en point final ou à " 2 points »

C solution 19 2

Consiste de

La spécifiqueUV visible

tempsplus 20

Cinétique enzymatique en Ultra

LeNAD/NADH NADP/NADPH

employé La

UV NAD+/NADHqui

sont Ces Cette 21

Méthodes cinétiques

Dans continu, fixée La réactif) stabilise Elle

Ppermet

22

Cinétique enzymatique en Ultra

NAD considérés(réaction

AH2 + NAD+ A + NADH,H

AH2 + NADP+ A + NADPH,H

[NAD+ ] > 10 NAD 23

Cinétique enzymatique en

NADH NAD+, Si réduction NAD+,la; oxydation deDO. Le

NADPHİ -cm- 24

Cinétique enzymatique en

NADH-cm-

NAD+ 25

AEMesure

de 340nm

AE diminution

de A340nm LDH NADн et NADH2 prĠsentent un pic d'absorbtion ( surtout NAD+) a 260 nm alors on mesure électivement Le NADH2 a 26

A 340 nm ( UV) Si on mesure :

27

Cinétique enzymatique en Ultra Violet

Condition cte

permet Dans tampon à

NADH,H .

Puispyruvate

On La droite 28

Lactate déshydrogénase

(EC 1.1.1.27)

Lactate = substrat

Pyruvate = produit

NAD+/NADH = cofacteur

29

Cinétique enzymatique en

OnDO/min

déclenchée, Les On

T E 3 UI.l-

VTet VE en3

30

Cinétique enzymatique en

DO = İ

DO1 İ 1 1=1 İ

DO2 İ 2 2=2 İ

2-1=DO2 İ DO1 İ

0 31

Cinétique enzymatique en

= x x 6

A 340 nm İNADH,H + = -. cm-.l.

AE en 32
VE VT

Réactions enzymatiques couplées

déshydrogénase à NAD+ ou NADP+ et que ni S et ni P ne possèdent de propriétés spectrales, alors on couple la première R à une deuxième, catalysée par une déshydrogénase dont P est le substrat. S P PH2 33
E1

NADH,H NAD+

Réactions enzymatiques couplées

La 1ere R principale

La 2eme R indicatrice

34

Réactions enzymatiques couplées

Exemple

Acɲ-

AOANADH,H Malate NAD+

35
ASAT

Réactions enzymatiques couplées

A correspond NADH,H . Dans 36

Réactions enzymatiques couplées

AE1 = AE2

Pour 1. pendant en 2. Dans pourV 37

Etude de trois R couplées

on couple la 1ere même couplée à une R indicatrice. S P X XH2 38

NADH,H

NAD+ E1 V2 V1 E2 V3 E3

R principale

R auxiliaire R indicatrice

Etude de trois R couplées

ExempleCK

R

CréatineATP

R

ATPglucose+

R

G+ NADPH,H+

On 39
CK hexokinase G6P

Déshydrogénase

Cinétique enzymatique colorimétrique

Exemple: Dosage des phosphatases alcalines (PAL)

p Le Le2;

Dosage

enregistrement = İ VT E 6UI-

İ 405 - -.

40
PALquotesdbs_dbs50.pdfusesText_50