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Franciaoktatas

Auteure : Anne Froment

© 2015 Institut français de Budapest

Titre du document Extraction d'ADN

Niveau B2

Objectifs Extraire l'ADN contenu dans des cellules

Durée de l'activité 1 séance de 45 mn

Public Section bilingue programme de biologie en classe de 13

Thème Génétique

FICHE PÉDAGOGIQUE PROFESSEUR

Résumé : Cette expérience permet aux jeunes de pouvoir observer à l'oeil nu un concentré d'ADN

qui, stocké dans le noyau des cellules, est normalement invisible. Le principe est donc d'isoler les

brins d'ADN et de les amasser pour les rendre visibles. Remarque : préférer le sopalin au filtre à café, la filtration est plus rapide.

A. Mise en condition

Chez les EV eucaryotes, l'ADN est compacté sous forme de chromosomes dans le noyau

cellulaire. Toutes les cellules d'un individu, à l'exception des cellules sexuelles (ovules et

spermatozoïdes) ou des cellules ayant subi des mutations ponctuelles (par exemple les cellules

cancéreuses) contiennent le même patrimoine génétique. En fait, l'ensemble des chromosomes

d'une cellule forment une sorte de " carte d'identité » de l'espèce et peuvent donner quelques

informations sur l'individu. Liste du matériel nécessaire pour l'expérience : - une banane - une assiette - une fourchette - une cuillère à café - un filtre à café (ou sopalin) - un tube à essai et un bouchon - du sel - de l'alcool à 90° ou de l'alcool à brûler - du liquide vaisselle - de l'eau

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Auteure : Anne Froment

© 2015 Institut français de Budapest

B. Expérience :

a) Obtenir la pulpe de banane Une moitié (voire un quart) de banane suffit pour réussir l'expérience. Vous devez d'abord casser les fibres du fruit et séparer les cellules. Pour cela, écrasez la banane pour obtenir une purée homogène, sans morceau. b) Ajoutez le sel

Ajoutez à la purée 2 grosses pincées de sel, soit l'équivalent d'une cuillère à café.

Veillez à ce qu'il se dissolve totalement dans le fruit.

Le sel a plusieurs fonctions : d'abord, il attire l'eau des cellules de façon si rapide que les

membranes cellulaires explosent. Le sel a aussi la capacité de séparer l'ADN des autres molécules.

c) Ajoutez le liquide vaisselle Ajoutez ensuite trois cuillères à café de liquide vaisselle. Le liquide vaisselle dissout les graisses et donc les lipides. Or, la membrane plasmique est constituée d'une double couche de phospholipides.

Mélangez bien, la préparation doit mousser.

d) Ajoutez de l'eau En ajoutant de l'eau, l'ADN libéré des noyaux des cellules va s'y dissoudre. e) Récupérez le filtrat

Utilisez le filtre pour récupérer le filtrat (par exemple au fond d'un verre d'eau). Attention

toutefois à ce que le filtre ne touche pas le fond du récipient. L'ADN passe à travers le filtre alors

que les cellules et les fibres qui n'ont pas explosées restent coincées. Le filtrat est alors composé

d'eau salée contenant de l'ADN et quelques autres protéines. Versez le filtrat obtenu dans un tube

à essai.

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Auteure : Anne Froment

© 2015 Institut français de Budapest

f) Extraction de l'ADN

Ajoutez le long de la paroi du tube à essai l'alcool à brûler. Les proportions sont 2 fois le filtrat

présent. Les deux liquides ne se mélangent pas, ils ont des densités différentes. L'ADN se

compacte sur lui-même, on dit qu'il précipite. ? On appelle cela méduse ou pelote d'ADNquotesdbs_dbs30.pdfusesText_36