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UMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
Surveillance des traitements
antifongiques: les antifongigrammes et les dosages d'antifongiques sont-ils utiles?Antifongigrammes
Pr. Michèle Mallié
UMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
• LevuresCandida albicans
Candida non-albicans (glabrata, tropicalis, parapsilosis, krusei, guilliermondii, ...)Cryptococcus neoformans
• FilamenteuxAspergillus sp.
Fusariumsp.
Scedosporiumsp.
Mucorales
d'après de Pauw B.E. et al., Hématologie, 2003; 9:3-8 Pfaller M. et al, J. Clin. Microbiol. 2010; 48:1366-77Principaux champignons dPrincipaux champignons d''intintéérêt mrêt méédical responsables dical responsables
d d''infections invasivesinfections invasivesUMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
• Méthodes de référenceDilution en milieu liquide
Diffusion en milieu solide
• Méthodes commercialiséesMMééthodes utilisthodes utilisééeses
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• Dilution en milieu liquide Standard américain : Clinical Laboratory StandardsInstitute (CLSI)
M27-A3: levures (Candida sp., Cryptococcus neoformans)M38-A2: champignons filamenteux (Aspergillus sp.,
Fusarium sp., Rhizopus oryzae....)
Standard européen : European Committee on
Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST)
MMééthodesthodes de rde rééfféérence (1)rence (1)UMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
CMI (mg/L) = Concentration Minimale InhibitricePlus petite concentration d'ATF qui donne une réductionvisible de la croissance de l'inoculum / Témoin
CME (mg/L) = Concentration Minimale Efficace Filamenteux / échinocandinesPlus petite concentration d'ATF pour laquelle on observe des hyphes courtes, trapues et compactes / Témoin
CMF(mg/L) = Concentration Minimale Fongicide
Plus petite concentration d'ATF qui tue 99,9% de l'inoculum ou qui diminue de 3 log au moins la densité de l'inoculum / Témoin
Lass-Flörl C. et al. Mycoses 2010; 53:1-11
MMééthodes de rthodes de rééfféérence (1):rence (1): expression des r expression des réésultatssultatsUMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
Antifungal EUCAST CLSI
(Standard européen) (Standard américain)Susceptible Intermediate Resistant Susceptib
le S-DD ResistantFluconazole
24>4 <8 16-32 64
Voriconazole
0.125 - >0.125 <1 2 4
Caspofungine NE NE NE
2* NE NE
Micafungine NE NE NE
2* NE NE
Anidulafungine NE NE NE2* NE NE
*CandidaCandida isolates with echinocandines MICs>2mg/L have been defined as nonsusceptible. Breakpoints to define S-DD end R
isolates have not yet been established. NE: Not established yet, S-DD Susceptible dependent on dose. Data en mg/L
d'aprés Cuenca-Estrella M. et al. Expert Rev. Anti Infect. Ther. 2010;8:267-276. MMééthodes de rthodes de rééfféérence (1):rence (1):Principales valeurs seuils d
Principales valeurs seuils d''interprinterpréétation pour tation pourCandida
Candida spsp. .
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• Diffusion en milieu solideClinical Laboratory Standards Institute (CLSI):
M44-A2: Candida sp./ fluconazole, voriconazole
et caspofungineClinical Laboratory Standards Institute, Method for Antifungal Disk Diffusion Susceptibility Testing of
Yeasts; Approved Standard, M44-A2. Wayne, PA: Clinical Laboratory Standards Institute, 2009 MMééthodesthodes de rde rééfféérence (2)rence (2)UMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
Résultats:
Diamètre d'inhibition de pousse (mm)
Valeurs établies M44-A2 vs M27
Susceptible S-DD Resistant
Fluconazole : 19mm 15-18mm
14mmVoriconazole: 17mm 14-16mm
13mmCaspofungine: 11mm
R: Resistant; S: Sensible; S-DD Susceptible dose dependent. D'après Canton E. et al. Expert Rev.Anti Infect Ther. 2010; 7:107-119 MMééthodes de rthodes de rééfféérence (2):rence (2): valeurs seuils d valeurs seuils d''interprinterpréétationtationUMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
Pas de valeurs seuils d'interprétation approuvées par le CLSI ou l'EUCASTCandida
sp : CMI > 1mg/L RAspergillus sp : CMI > 1mg/L R
Johnson EM. J. Antimicrob. Chemother. 2008; 61: 113-118. Clinical Laboratory Standards Institute, Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeast; Approved Standard, M27-A2. Wayne, PA: Clinical LaboratoryStandards Institute
, 2008. Cas particulier: Cas particulier: amphotamphotééricinericine BBUMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
Verweij PE.et al. Drug resistance updates 2009; 12: 141-147.Drug Susceptible Intermediate Resistant
Itraconazole <2 2 >2
Voriconazole <2 2 >2
Posaconazole <0.5 0.5 >0.5 Proposition de valeurs seuils pour les différentes catégories (S, I, R)
d'Aspergillus fumigatus vis-à-vis des antifongiques azolés actifs Pas de valeurs seuils d'interprétation approuvées par leCLSI ou l'EUCAST
Cas particulier: Cas particulier: azolazolééss / filamenteux/ filamenteuxUMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
Méthodes automatisées ou semi-automatisées, validées / méthodes de référence % corrélation avec les standards (CLSI, EUCAST) EtestSensititre YeastOne
Vitek 2ATB™ Fungus 3
Néo-Sensitabs™ tablet
Fungitest
MMééthodes commercialisthodes commercialiséées (1)es (1)UMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
• Avantages / Méthodes de référence :Faciles à utiliser en routine + économiquesRésultats + rapides
Facilité d'interprétation
Alternative pour la pratique clinique et screening pour le dépistage des souches avec des CMI hautes Cuenca-Estrella M. et al. Expert Rev. Anti Infect. Ther. 2010; 8: 267-276. MMééthodes commercialisthodes commercialiséées (2)es (2)UMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
• Inconvénients / Méthodes de référence N'ont pas développé leurs propres " valeurs seuils d'interprétation » mais proposent des valeurs obtenues par corrélation avec CLSI ou EUCASTL'utilisation des valeurs propres au CLSI et à
l'EUCAST n'est pas recommandée Cuenca-Estrella M. et al. Expert Rev. Anti Infect. Ther. 2010; 8: 267-276. MMééthodes commercialisthodes commercialiséées (3)es (3)UMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
Quelques applications Quelques applications
pratiques pratiquesUMR 145 " VIH/Sida et Maladies associées »
Pfaller M. et al, J. Clin. Microbiol. 2010; 48:1366-77SensibilitSensibilitéé in vitro de in vitro de Candida Candida spsp. au . au fluconazolefluconazole et et
voriconazole voriconazole