[PDF] Chromatographie en Phase Liquide (HPLC) PDF Chromatographie%20en%20phase%20liquide.pdf

attention document incomplet 1 Présentation générale de l'HPLC En chromatographie liquide classique on utilise des colonnes qui mettent en œuvre des

20 jan 2010 · A l'origine la chromatographie en phase liquide se faisait sur des colonnes en verre Le liquide traversait la phase stationnaire par gravité ou

[PDF] 4 CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE

de préférence « de haute performance » [HPLC] Ainsi, jusqu'à ces années 1958- 1960, la chromatographie en phase liquide sur colonne (CL), bien qu'étant la

[PDF] Chromatographie en phase liquide haute pression HPLC High

L'HPLC (nous emploierons l'acronyme anglo-saxon, le seul utilisé) a de multiples applications dans de nombreux domaines, seule son utilisation en biologie

[PDF] Chromatographie Liquide de Haute Performance (CLHP-HPLC) - Free

X Bataille – ENCPB - 2008 Comparaison CPG-CLHP CPG : Chromatographie en Phase Gazeuse : ○ composés volatils, ○ faibles masses molaires CLHP :

[PDF] Mémoire LATIFA BEN SAAD - International Nuclear Information

analytique la chromatographie liquide à haute performance à polarité de phase inversée (HPLC) L'objectif de cette étude est d'optimiser une méthode de

[PDF] Chromatographie en Phase Liquide (HPLC)

attention document incomplet 1 Présentation générale de l'HPLC En chromatographie liquide classique on utilise des colonnes qui mettent en œuvre des

[PDF] CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE - BIENVENUE SUR LA PAGE DE

la chromatographie d'adsorption (LSC, GSC) (lorsque la phase stationnaire la silice ou l'alumine En H P L C c'est surtout les gels de silice qui sont utilisés

[PDF] HPLC, Séparation des composés principaux de la vanille

paramètres de la séparation de la chromatographie, et finalement de doser les composés Dans ce TP la méthode de HPLC utilisée est celle de partage

[PDF] Développement pour les méthodes Flash et Prep HPLC - Buchi

Principes de Chromatographie Effectuer la HPLC analytique dans des conditions standards • Ajuster la Passer à une colonne prep HPLC • Choisir une

Chromatographie en Phase Liquide (HPLC)

➢attention document incomplet...

1. Présentation générale de l'HPLC

En chromatographie liquide classique on utilise des colonnes qui mettent en oeuvre des phases

stationnâmes de granulométrie assez élevée (le diamètre des grains de phase stationnaire est élevé).

Ceci à 2 conséquences :

- " une positive » ; la résistance à l'écoulement est assez faible : on peut éluer avec des pressions

faibles ;

- " une fâcheuse » ; puisque la granulométrie est élevée, les durées de diffusion dans la phase mobile

en absence de tout contact possible avec la phase stationnaire sont élevées. Ainsi les événements de

rétentions différentielles qui sont le fondement des séparations chromatographiques sont rares : la

colonne n'est pas très performante !

Une phase stationnaire est a priori d'autant plus performante que sa granulométrie est faible (ceci

favorise les rétentions différentielles par la phase stationnaire). Mais la phase stationnaire devient alors

très résistante à l'écoulement ! : il faudra une pression très élevée pour faire passer un liquide au travers

Commentaire technique plus précis :

Soit une colonne cylindrique rigide de longueur / (en m), de section s (en m2).

Soit cette colonne remplie d'une phase stationnaire poreuse avec des particules de diamètre ØP (en m).

Soit η la viscosité de la phase mobile percolant la colonne (en Pa.s) et u la vitesse linéaire de

percolation (en m.s-1).

Soit ϕ le facteur de résistance caractéristique des particules de la colonne (c'est un nombre sans

dimension qui dépend de la géométrie des particules poreuses de phase stationnaire). On montre que la résistance à l'écoulement R de la colonne est : R = ( ϕ η l ) / ( ØP ² s) (loi de Darcy) Or, pour assurer un débit D (en m3.s-1), il faut un gradient de pression ΔP tel que :

ΔP = R D

D'où :

ΔP = ( ϕ η l u) / ( ØP ² ) puisque D = u s

On voit ainsi par la formule de Darcy que le gradient de pression nécessaire pour assurer un débit

donné est (.../...) Les progrès techniques ont permis la mise au point de :

- phases stationnaires de granulométries très fines donc très performantes et capables de résister aux

pressions très élevées nécessaires à la percolation d'une phase liquide au travers (il ne faut pas que la

phase stationnaire s'écrase sous la pression !) ; - pompes capables de pomper sous faible débit très régulier et sous haute pression ; - d'injecteurs en ligne pouvant travailler sous haute pression.

A cet ensemble on a ajouté des systèmes de détection de sortie de colonne " en ligne, en continu », très

performants, associés à des calculateurs.

On a ainsi amélioré globalement les performances séparatives et analytiques des chromatographies

liquides. On parle aujourd'hui de techniques HPLC pour ces chromatographies. En HPLC toutes les chromatographies liquides sont possibles : - adsorption sur phase stationnaire adsorbant non chargé, - échange d'ions ; - exclusion-diffusion ;

Fanny Demay - BTS BioAnalyses & Contrôles1/2

doc from JF Perrin

- utilisation de phases greffées avec les motifs chimiques les plus variés : très polaires, apolaires

(note : les phases greffées de motifs apolaires sont appelées phases inverses ou (reverse phase en

anglais)). La structure globale d'un ensemble d'HPLC est finalement la suivante : attention schéma à connaître par coeur !

Fanny Demay - BTS BioAnalyses & Contrôles2/2

quotesdbs_dbs5.pdfusesText_9

[PDF] [PDF] Chromatographie en Phase Liquide (HPLC)

[PDF] HPLC Principe et appareillage - Biotechnologie & Biologie et