[PDF] Etude expérimentale de la phosphatase alcaline



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Aide à la rédaction de comptes-rendus de TP

rédaction de comptes-rendus de TP en général Rédaction Le compte rendu doit être rendu le jour J Il faut alors le rédiger à l’avance pour pouvoir



Chapitre 17 : Piles et Accumulateurs TP : Etude de piles et

PREMIERE S THEME C_C17_TP ,Page 2 sur 4 COMPTE-RENDU les numéros de questions entourés sont à faire avant la séance, les autres seront complétées pendant la séance Données : Couples rédox mis en jeu dans le T P ???? (????????) 2+ /???? (????) ????????(????????) 2+ /???????? (????) ????????(????????) 3+/???????? (????????) 2+



Compte rendu de TP : PC* Nom du candidat : Vincent Tejedor

Compte rendu de TP : PC* Nom du candidat : Vincent Tejedor Date de l’épreuve : 14/07/2004 École : Mines-Ponts Durée de préparation : 0 Durée de passage : 4 h Sujet: Étude de la résistance négative, et application à l’oscillation d’un circuit RLC I Étude théorique



TRAVAUX PRATIQUES DE THERMODYNAMIQUE

Les séances de TP durent 4 heures pendant lesquelles vous êtes susceptibles d’être interrogés sur votre préparation Chaque élève sera interrogé et noté au minimum une fois lors des 6 séances Vous devez manipuler pour répondre aux questions de l’énoncé Vous devez rendre à la fin de la séance un compte-rendu qui sera noté



Travaux pratiques de Résistance des matériaux (TP RDM)

Pour chaque essai de flexion réalisé sur une poutre donnée, le groupe concerné par ce TP va tracer des courbes de chargements, calculer des déflections et déterminer au final des modules d'élasticité 2 Principe de l'essai de flexion La flexion trois points est un essai mécanique classique Il représente le cas d'une poutre



TP AUTOMATISME

compte 96 étapes, les divergences et convergences sont limitées à 4 voies L'écran ne montre qu'une petite partie de la page, mais le numéro de page (P), de ligne (L) et de colonne (C) sont toujours affichés On se déplace par les flèches, ou en tapant P, L, C ou X (étape) suivi du numéro désiré



TP26:Équationd’étatdesgazparfaits

TSI1–Physique-chimie TP26:Équationd’étatdesgazparfaits TP26:Équationd’étatdesgazparfaits Matériel:Dispositifexpérimental“LoideMariotte



Chapitre 10 : Dissolution de composés solides ou moléculaires

PREMIERE S THEME B_C10_TP Page 3 sur 6 COMPTE-RENDU à faire avant la séance pratique PARTIE 1 : Solubilité / Miscibilité L’objectif de cette partie est de comprendre quelles sont les conditions de polarité sur les espèces chimiques permettant leur miscibilité / solubilité 1



TP 2: Diodes - UNIGE

TPA Electronique (2015-16) TP 2: Diodes — 3/´ 7 (b) Mesurez le courant I et comparez votre resultat au point de fonctionnement trouv´ ´e ci-dessus, en tenant compte des tolerances sur les divers composants ´ 3 Produisez une autre droite de charge en changeant la valeur de R, en prenant soin de ne pas exceder le´



Etude expérimentale de la phosphatase alcaline

Dans ce TP, nous allons utiliser une préparation commerciale de phosphatase alcaline de veau Il s’agit d’une enzyme alcaline à 2 substrats, capable d’hydrolyser les monoesters phosphoriques selon la réaction suivante : R-O-PO3 2-+ H2O R-OH + HPO4 2-II Principe

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Etude expérimentale de

la phosphatase alcaline Enzymologie 2

Cabaret Laurine

Martin Laetitia

Groupe C2

01/10/2010

I. Introduction

Le but de cette manipulation est de déterminer les paramètres cinétiques d'une enzyme aifin

d'étudier l'inlfluence de la concentration en substrat et de la présence d'un inhibiteur sur la

vitesse de réaction. Dans ce TP, nous allons utiliser une préparation commerciale de phosphatase alcaline de veau. Il s'agit d'une enzyme alcaline à 2 substrats, capable d'hydrolyser les monoesters phosphoriques selon la réaction suivante :

R-O-PO3 2- + H2O R-OH + HPO4 2-

II. Principe

Aifin de suivre la réaction enzymatique, nous allons réaliser un dosage spectrophotométrique

des produits apparus dans le milieu, lorsque l'enzyme est en présence de son substrat. Pour faciliter le dosage, nous allons utiliser comme substrat le P-nitrophénolphosphate (PNPP) qui, après action de l'enzyme, libère un produit coloré (jaune) : le P-nitrophénol (PNP) directement dosable à 410nm. + H2O HPO42- +

PNPP incolore PNP coloré

Le principe du dosage spectrophotométrique est de mesurer l'absorbance d'une substance

colorée, au cours du temps. Le spectrophotomètre est relié à un dispositif d'enregistrement

(ordinateur), qui nous permet de visualiser l'évolution de l'absorbance dans un intervalle de

temps (3min), et donc de déterminer la vitesse initiale de la réaction enzymatique grâce à la

pente de la droite obtenue, dans les temps initiaux (ΔDO/min). De plus, pour connaître la quantité de produit apparu dans le milieu, on réalise une gamme étalon de tubes contenant diffférente concentration (connues) de produit. On trace la droite DO = f ([PNP]). En reportant l'absorbance d'une solution de concentration inconnue, on peut en déduire sa concentration.

III. Manipulations préliminaires

Aifin de réaliser la gamme étalon et les milieux d'incubation, nous devons préalablement préparer les solutions de substrats de concentrations diffférentes.

1) Solution de PNPP :

Nous voulons préparer 6 tubes de solution de PNPP à 2,5 mM, 1mM, 0,5mM, 0,25mM,

0,167mM, 0,125mM, à partir d'une solution mère de 5mM. Pour cela, nous efffectuons une

dilution en cascade.

10mL 8mL 10mL 10mL 13,4mL 5mL

5mM 2,5 mM 1mM 0,5mM 0,25mM 0,167mM 0,125mM

[PNPP] (umol /L) 5mM 2,5mM 1mM 0,5mM 0,25mM 0,167mM 0,125mM

Solution

mère (mL) 20 10 8 10 10 13,4 5

H20 (mL) 0 10 12 10 10 6,6 15

Calcul pour la première dilution :

C1 V1 = C2 V2

V1 = 20mL

Donc V1 = (C2 V2 )/ C1 V = (0,0025 * 0,02) / 0,005 = 10 mL Il faut donc prélever 10mL de la solution mère, et ajouter 10mL d'eau pour la diluer 2 fois.

2) Solution de glycérophosphate :

Comme précédemment, nous voulons préparer 2 tubes de solution de glycérophosphate à

2,5mM et 1mM, à partir d'une solution mère à 5mM.

7mL 4mL

5mM 2,5 mM 1mM

[GRO-P] 5mM 2,5mM 1mM

Solution mère (mL) 10 7 4

H20 (mL) 0 7 6

Calcul pour la première dilution :

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