[PDF] Préparation au certificat de prélèvement sanguin

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Préparation

au certificat de prélèvement sanguin Chantal Muller - Professeur au lycée La Martinière Duchère - Lyon9 Conditions de délivrance du certificat de prélèvement

Sommaire

Conditions de délivrance du certificat de prélèvement sanguin).......................................3

Importance du prélèvement sanguin lors d'une analyse biologique ................................8

Analyses biologiques et nature du composant sanguin étudié.........................................11

Asepsie - Désinfection - Stérilisation et Hygiène des mains.........................................25

Prévention lors du prélèvement sanguin..........................................................................33

Points de ponctions autorisés...........................................................................................36

Dispositifs pour prélèvements veineux ..........................................................................39

Tubes pour le recueil de sang veineux.............................................................................44

Règles d'étiquetage - Conservation et Transport.............................................................57

Accueil du patient -Installation et recueil de renseignements........................................64

Technique du prélèvement veineux.................................................................................70

Conduite à tenir en cas d'incident ou accident de prélèvement .....................................76

Prélèvements de sang capillaire ......................................................................................82

Prélèvement sanguin en biochimie..................................................................................86

Prélèvement sanguin en hématologie..............................................................................94

Prélèvement sanguin en sérologie...................................................................................97

Prélèvement sanguin immuno-hématologie....................................................................98

Prélèvement sanguin en virologie....................................................................................99

Prélèvement sanguin en parasitologie.............................................................................99

Prélèvement sanguin des hémocultures.........................................................................100

avril 2012

2- CM© - Lycée La Martinière Duchère-Lyon

Prélèvement sanguin Enseignements théoriques onditions de délivrance du certificat de prélèvement sanguin

(Arrêté du 13 mars 2006)CSeuls les techniciens(nes) de laboratoire titulaires d'un BTS ABM (Brevet de Technicien Supérieur en

Analyses de Biologie Médiale), BTS BioAC (Brevet de Technicien Supérieur en BioAnalyses et

Contrôles), d'un DUT (Diplôme Universitaire de Technologie) ou d'un DETAB (Diplôme d'État de

Technicien d'Analyses Biologiques) peuvent passer les épreuves de ce certificat.

1 Nature des épreuves

1.1 Épreuve théorique

L'épreuve est organisée par le Directeur de l'ARS (agence régionale de santé).

Il s'agit d'une épreuve écrite, anonyme, d'une durée d'1 heure et qui comporte 10 questions  note/20

Le candidat doit obtenir une note ³ 12 pour être admis au stage réglementaire. La durée du bénéfice de

cette note est de 2 ans. Cette épreuve peut se passer au cours des études.

1.2 Stage

Il comporte la réalisation de 40 prélèvements de sang veineux ou capillaire, dont 30 au pli du

coude effectués sur une période de 3 mois maximum. Celui-ci doit être effectué dans un délai

maximum de 2 années après la validation de la théorie.

Le stage doit être effectué sous la direction d'un moniteur de stage désigné par de directeur de l'ARS,

sur propositions du chef de service intéressé, dans l'un des établissements suivants : -un établissement hospitalier public -un établissement hospitalier privé admis à participer au service public -un établissement hospitalier relevant du ministère de la défense -un dispensaire antivénérien -un établissement de transfusion sanguine

Le moniteur de stage tient pour chaque candidat un carnet de stage (cf annexe) sur lequel sont portés :

-les dates des séances auxquelles le candidat a participé -le nombre de prélèvements qu'il a effectués -la note donnée aux 40 prélèvements (de 0 à 2) Ce carnet sera transmis à la fin du stage au directeur des affaires sanitaires et sociales.

Attention : pour se présenter ensuite à l'examen pratique, le candidat doit avoir une note ³ 50/80

En cas d'échec, le directeur de l 'ARS peut autoriser le candidat à recommencer le stage dans la limite

d'une seule fois. Pour effectuer ce stage, il faut être titulaire du BTS ABM, BTS BioAC, DUT. Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9- CM© - 3

Tubes pour le recueil de sang veineux

1.3 Formation aux gestes et soins d'urgence de niveau 2

Cette formation est décomposée en 3 niveaux, seul les 2 premiers niveaux sont obligatoires pour

obtenir le certificat de préleveur. A la fin de cette formation, une attestation est donnée : AFGSU de niveau 2.

Objectif des deux premiers niveaux :

•Niveau 1 : Acquérir les connaissances pour identifier une urgence à caractère médical et effectuer la

prise en charge seul ou en équipe en attendant une équipe médicale.

•Ni veau 2 : Identique au niveau 1 en utilisant des techniques non invasives (ex : retrait de casque,

utilisation de chariot d'urgences, etc....).

Cette formation sera dispensée gratuitement aux étudiants de B1 et B2ABM au lycée La Martinière

Duchère de Lyon 9.

1.4 Épreuve pratique de prélèvement

L'épreuve pratique, consiste à effectuer trois prélèvements sanguins dont deux au pli du coude devant

un jury.

Pour être déclaré admis, le candidat doit avoir obtenu une note égale ou supérieure à 12.

Elle est effectuée en présence d'un jury constitué par l'Inspecteur départementale de la santé ou un

médecin le représentant, un médecin chef désigné par le Directeur de l'ARS.

Attention : les candidats ayant échoué 2 fois à l'épreuve ne peuvent s'y présenter à nouveau avant

l'expiration d'un délai de 3 ans.

Les étudiant s de BTS ABM peuvent présenter l'épreuve théorique au cours de la 2ème année d'étude.

Ils ne peuvent se présenter à l'épreuve pratique qu'après avoir obtenu le BTS.

4- CM© - Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9

Prélèvement sanguin Enseignements théoriques

2 Programme de formation

(JO N° 93 du 20 avril 2006)

2.1 Notions générale sur les prélèvements sanguins

2.1.1 Différents prélèvements sanguins

·nature du sang prélevé : veineux ou capillaire

·principales analyses sanguines

2.1.2 Règles d'étiquetage

2.2 Notions techniques générales

2.2.1 Différents matériels utilisés

2.2.2 Entretien des matériels

2.3 Méthodes de prélèvements

2.3.1 Données anatomo-physiologiques

2.3.2 Techniques de prélèvement de sang veineux ou capillaire

2.3.3 Conduite à tenir en cas d'incident ou d'accident

2.4 Modalités de transmission du prélèvement

2.4.1 Différentes voies d'acheminement

2.4.2 Conditionnements et emballages

2.5 Élimination des déchets

Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9- CM© - 5

Tubes pour le recueil de sang veineux

Annexe : Carnet individuel

Nom : ..........................................................................................................................................................

Épouse : ......................................................................................................................................................

Prénoms : ....................................................................................................................................................

Date et lieu de naissance : ..........................................................................................................................

Adresse personnelle : .................................................................................................................................

Diplômes : ..................................................................................................................................................

Agence régionale de santé (cachet) :

Épreuve théorique

Note sur 20 : ........................................ Attestation de formation aux gestes et soins d'urgence de niveau 2

Délivrée par : ..............................................................................................................................................

Date : ................................................... Stage

Type d'établissement et raison sociale : ....................................................................................................

(Préciser le service.)

Adresse : .....................................................................................................................................................

Nom et fonction du maître de stage : ..................................................................

Numéro de téléphone : ........................................................................................

Courriel : ..............................................................................................................

Stage effectué du .............................................. au .............................................

DATES DES

SÉANCES NOMBRE DE

PRÉLÈVEMENTS

au pli du coude AUTRES

PRÉLÈVEMENTS

(à préciser) APPRÉCIATIONS

Appréciation générale : ..............................................................................................................................

Note sur 20 : ........................................

Visa et cachet du maître de stage : ................................................................

6- CM© - Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9

Prélèvement sanguin Enseignements théoriques

Épreuve pratique

Date : ..........................................................................................................................................................

Lieu : ..........................................................................................................................................................

Composition du jury : ................................................................................................................................

Types de prélèvements (dont deux au pli du coude) : préciser la localisation :

-prélèvement 1 : .......................................................................................................................................

- prélèvement 2 : .......................................................................................................................................

- prélèvement 3 : .......................................................................................................................................

Appréciation générale : ............................................................................................................................

Note sur 20 : ........................................ Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9- CM© - 7 Importance du prélèvement lors d'une analyse biologiques mportance du prélèvement sanguin lors d'une analyse biologique I1 Buts des principales analyses sanguines Les analyses de biologie médicale sont des examens biologiques qui concourent au diagnostic, au traitement ou à la prévention des maladies humaines ou qui font apparaître toute autre modification de l'état physiologique (Loi 11/07/75 Art. L 753)

L'analyse est prescrite par le médecin traitant, l'analyse biologique associée aux signes cliniques

permet : •Le diagnostic

Les analyses des produits sanguins, associées à la clinique, permettent le diagnostic d'une maladie

par : -mise en évidence d'agents infectieux présents dans le sang : ✗micro-organismes vivants, par hémoculture, ✗parasites sanguins fixés sur frottis ou goutte épaisse,

✗fractions d'agents infectieux, par méthodes immunologiques, par amplification génique,...

-modification qualitative ou quantitative de paramètres biologiques : ✗hématologiques : anémie, hyperleucocytose, blastose... ✗biochimiques : augmentation de la glycémie, de la cholestérolémie,... -mise en évidence d'analytes normalement absents (toxiques, marqueurs spécifiques) •La surveillance thérapeutique Certaines thérapeutiques nécessitent un suivi pour : -déterminer l'efficacité du traitement :

✗de l'insulinothérapie par mesure de la glycémie et dosage de l'hémoglobine glyquée,

✗d'une rémission d'hémopathie (carence martiale, hémopathie maligne...) par retour à la normale

des paramètres biologiques,... -déterminer la persistance du médicament dans l'organisme du patient : ✗dans les traitements anticoagulants, ✗dans les antibiothérapies,... -éviter les effets adverses (traitements anti-rejet de greffe, anti-épileptique..) •La prévention Parfois, il est indispensable de connaître le statut du sujet afin de mieux prévenir : -certaines maladies infectieuses par :

✗suivi immunologique de la femme enceinte afin de prévenir une infection foetale (rubéole,

toxoplasmose congénitales,...), -certaines pathologies alloimmunes par :

✗phénotypage érythrocytaire, mise en évidence puis titrage d'anticorps irréguliers de classe IgG

pouvant passer la barrière placentaire et fragiliser les érythrocytes foetaux (voire en provoquer

l'hémolyse),... -certains accidents thérapeutiques par :

✗phénotypage érythrocytaire du sang du donneur et mise en évidence des agglutinines irrégulières

8- CM© - Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9

Prélèvement sanguin Enseignements théoriques chez le receveur, avant transfusion sanguine, ✗bilan de l'hémostase avant une anesthésie et/ou une intervention chirurgicale. -certaines pathologies génétiques (hémoglobinopathies, mucoviscidose..) .

2 Étapes d'une analyse biologique

La réalisation d'une analyse de biologie médicale inclut plusieurs étapes :♥ -la prescription

-la phase pré-analytique : elle débute dès la préparation du prélèvement et s'arrête quand l'analyse

proprement dite de l'échantillon commence.

Elle comprend

✗l'état du patient (à jeun ou non), ✗l'enregistrement des demandes d'analyses, ✗la phase de prélèvement proprement dite, ✗l'étiquetage des échantillons prélevés,

✗le prétraitement éventuel de l'échantillon (centrifugation, aliquotage, filtration lyse des cellules

etc...). ✗le transport et la conservation au laboratoire adapté, dans des conditions optimales -la phase analytique ✗processus technique permettant l'obtention d'un résultat d'analyse biologique -la phase post-analytique

Elle comprend :

✗la validation technique du résultat par le technicien, ✗la validation biologique et l'interprétation du résultat par le biologiste

✗la communication appropriée du résultat au prescripteur et au patient (dans les conditions fixées

à l'article L. 1111-2) dans un délai correct (article L. 6211-2 du Code de la santé publique).

✗la conservation de l'échantillon après analyse. Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9- CM© - 9 Importance du prélèvement lors d'une analyse biologiques

3 Importance du " prélèvement » dans l'analyse

Quelques statistiques

Les erreurs commises pendant la phase pré-analytique sont de 85 % :

 demande de prélèvement non conforme (incomplète, croix placées entre 2 cases...) : 5 %

 utilisation de tubes périmés : 9 %  mauvaise identification des échantillons : 22 %  tubes avec un ratio anticoagulant/sang non conforme ou utilisation d'un mauvais anticoagulants : 17 %  tubes manquants : 17 %  tubes souillés par du sang : 31 %

 les tubes trop chauds ou trop froids (mauvaise température de conservation) ou temps entre le

prélèvements et l'analyse est trop long  tubes hémolysés ..... La phase préanalytique est impliqué dans 68 % des erreurs en coagulation.

Conclusion : ♥♥♥

Les prélèvements sanguins font partie de la phase pré-analytique.

Celle-ci comprend :

-la prescription -l'accueil et l'interrogatoire des patients -le prélèvement proprement dit -l'identification, le transport, la conservation des échantillons biologiques .

Le préleveur doit donc maîtriser :

✗les facteurs de variations physiologiques et physiopathologiques propres au patient ✗les facteurs liés à l'environnement, l'alimentation et la prise de médicaments ✗les facteurs liés au prélèvement et à son acheminement vers le lieu d'analyses.

L'existence de procédure rigoureuse permet d'assurer la sécurité des patients et des personnels de

laboratoire, la qualité des résultats et la diminution des coûts.

10- CM© - Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9

Prélèvement sanguinEnseignements théoriques nalyses biologiques et nature du composant sanguin étudiéA1 Pré-requis

1.1 Composition du sang

Sang = tissu fluide de type conjonctif (cellules isolées en suspension dans un liquide, le plasma)

cf. cours hématologie B1ABM.

1.1.1 Cellules sanguines

Globules rouges, hématies, érythrocytes

Globules blancs, leucocytes

Plaquettes, thrombocytes

Attention : les cellules sont fragiles, leur analyse doit se faire le plus rapidement possible

1.1.2 Plasma

1.1.2.1Obtention du plasma

Si on recueille le sang dans un tube en verre (surface mouillable), le sang coagule.

Pour éviter la coagulation, on recueille le sang dans un tube siliconé (surface non mouillable) ou

beaucoup mieux ou tube contenant un anticoagulant. Le plasma est séparé des cellules par centrifugation

1.1.2.2Composition du plasma

•eau (environ 90 %) •sels minéraux •gaz O2, CO2 •molécules organiques : -protides (protéines 72 g/L, acides aminés) -glucides (ex : glucose 1 g/L) - lipides (ex : cholestérol, LDL, HDL ...) -enzymes (ex : amylase, gamma glutamyl transférase, lactate deshydrogénase...) -hormones ( ex :insuline, hormone thyréostimulante...) -Anticorps = Immunoglobulines -facteurs de la coagulation

-de plus c'est un lieu où se déversent certaines substances cellulaires (ex : déchets comme urée,

acide urique ....) Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9- CM© - 11 Analyses biologiques et nature du composant sanguin étudié Document : comparaison des concentrations de divers composants du plasma et des érythrocytes

ComposantsRapport de concentration :

É rythrocytes

plasmaConclusion

Lactate déshydrogénase

Phosphatase acide

ASAT

Potassium

ALAT

Magnésium

Créatinine160

67
40
23
7 2,5 1,5

Glucose

Urée

Phosphore inorganique

Hydrogénocarbonates

Acide urique

Chlorure

Sodium

Calcium0,8

0,8 0,8 0,7 0,55 0,5 0,1 0,1

Que se passe-t-il si les hématies éclatent (hémolyse) et libère leur contenu dans le plasma , concernant

le dosage des divers composants dans le plasma ?

1.2 Hémostase

1.2.1 Hémostase in-vivo

© L'hémostase est un mécanisme de défense permettant : yl'arrêt des hémorragies en cas de rupture de la paroi vasculaire yla prévention des saignements spontanés yl'élimination des thromboses éventuelles et la réinsertion de la circulation sanguine

Elle met en jeu un ensemble de phénomènes interdépendants, mécaniques, physico-chimiques,

biochimiques et enzymatiques. © Elle nécessite la coopération entre : -la paroi vasculaire, -des protéines plasmatiques et tissulaires de la coagulation -les plaquettes sanguines -le calcium (Ca 2+ ). Cet équilibre est maintenu physiologiquement par une balance entre les facteurs activateurs et inhibiteurs de la coagulation et de la fibrinolyse .

12- CM© - Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9

Prélèvement sanguinEnseignements théoriques L'hémostase est divisée en plusieurs étapes qui se recouvrent partiellement :

Déclenchement : brèche vasculaire

H émostase primaire (3 à 5 min) 8 formation d'un agrégat plaquettaire encore appelé " clou plaquettaire hémostatique » ou " thrombus blanc », provoquant un arrêt temporaire du saignement uniquement au niveau de vaisseaux de petit calibre (capillaires). H émostase secondaire , (5 à 10 min) 8 permet la consolidation de cet agrégat par un

caillot de fibrine (insoluble)La fibrine est formée à partir d'un précurseur plasmatique, le fibrinogène sous l'action d'une enzyme

plasmatique, la thrombine.

Rétractation et fibrinolyse (48 à 72 h) 8 permet la dégradation du caillot et le retour à

une circulation sanguine normale. Le caillot de fibrine est dégradé sous l'action d'une enzyme plasmatique, la plasmine (précurseur : le plasminogène). L'hémostase primaire est testé in vivo chez le patients en mesurant le temps de

saignement (TS) nécessaire à l'arrêt de l'écoulement sanguin après avoir incisé des capillaires

superficiels de l'avant bras (TS d'IVY) ou du lobe de l'oreille (TS de DUKE).

1.2.2 Hémostase in-vitro

Le sang coagule spontanément hors des vaisseaux ou en contact avec une surface anormale (mouillable) ou en présence d'extrait tissulaire.

H coagulation par contact avec une surface mouillable 0 .....................................................

Les cellules sont d'abord emprisonnées dans un réseau de fibrine, on obtient le caillot sanguin.

Puis le caillot de fibrine se rétracte (sous l'action des plaquettes) et laisse exsuder un liquide =

H Si on ajoute dans un tube siliconé, un extrait tissulaire contenant de thromboplastine tissulaire, la

coagulation s'effectue en quelques secondes .0 .....................................................

Cette fibrine a été formée à partir d'un précurseur qui était présent dans le plasma = le fibrinogène.

Donc :

La différence essentielle entre plasma et sérum est l'absence de fibrinogène dans le sérum.

Attention : d'autres différences existent : toutes les analyses ne sont pas réalisables à partir du sérum.

Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9- CM© - 13tempsCaillot rétracté

Quelques hématies

sédimentées

Temps 0Sang liquidePrise en masse,

caillot

Temps = 10 min si tube en

verre, plus longtemps si tube siliconé ou tube plastiqueTemps 1 à 4 heures à 37°C Analyses biologiques et nature du composant sanguin étudié

Autres différences, dans le sérum :

-d'autres facteurs (différent du fibrinogène) sont fortement abaissés -il y a consommation d'O2 et de glucose par les cellules sanguines -il y a production de CO2 et d'acides organiques donc diminution du pH.

C ascade de la coagulation (notions)

Des tests ont été mis au points pour explorer (cf. TP B2ABM) : -la coagulation intrinsèque : le temps de céphaline + activateurs -la coagulation extrinsèque : le temps de Quick -le dosage du fibrinogène -etc ..... La fibrinolyse nécessite l'activation du plasminogène plasmatique en plasmine. La fibrine est alors lysés en PDF (produits de dégradation de la fibrine).

14- CM© - Lycée la Martinière Duchère - Lyon 9Prothrombine (II) Thrombine(IIa)Activation d'un complexe enzymatique

plasmatique : la prothrombinasefacteurs plasmatiques, Ca 2+

Fibrinogène fibrine (armature du caillot)Coagulation ...........................Coagulation ........................

Surface mouillableThromboplastine tissulaire (tissu, GR) facteurs plasmatiques

Ca 2+ , plaquettes

Prélèvement sanguinEnseignements théoriques

2 Fraction de sang utilisée pour les analyses

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