PRÉPARATION DE TISSUS POUR INCLUSION ET COUPE
COUPE PARAFFINE. Nous prenons les échantillons déjà fixés et en cassette dans l'alcool. À préparer avant tout prélèvement : - Les tissus seront fixés
Aperçu des principales colorations histologiques et intérêt pour le
Les coupes du bloc de paraffine sont réalisées avec un microtome permettant des bains) l'épaisseur de coupe du tissu (trimming adéquat). Chaque étape ...
PREPARATION DUNE LAME HISTOLOGIQUE
prélevée est rigide en présence de paraffine solide dans l'espace intracellulaire de chaque cellule composant le tissu. OU. 7. Confection des coupes
Actualisation de la technique complète des coupes à la paraffine
Certains techniciens ajoutent parfois de la cire d'abeille car elle confère à la paraffine une souplesse qui améliore la facilité de coupe et l'adhérence de la
Microscopie Paraffine en pastilles Histosec® en pastilles Histosec
Les coupes fines de telle sorte forment la condition pour que le tissu puisse être analysé dans un microscope à immersion. Matériel d'echantillons. Matériel
TP 7 Histologie Les techniques de MO et de ME sont utilisées en
Dans certains cas on utilise d'autres milieux d'inclusion (celloïdine
Université Frères Mentouri Constantine 1 1ère année LMD / TC / SNV
e) Coupe (Microtomie). Le passage du bloc de paraffine dans un microtome Éliminer la paraffine en passant les lames dans des bains de toluène ou de xylène.
08.03.006 f2.0 Sectionnement des tissus enrobés de paraffine et d
1 juin 2012 Les coupes tissulaires sont montées sur des lames pré-refroidies en retournant la lame avec un petit angle par-dessus la coupe comme s'il s' ...
UNE MÉTHODE DIMPRÉGNATION ARGENTIQUE RAPIDE SUR
Nous avons eu du succès avec une méthode très rapide pour coupes à la paraffine dont voici les diverses étapes: 1. Débarassez la coupe de 10 /i de la paraffine
Les techniques de préparation des coupes pour les microscopies
LES COUPES. Les coupes du bloc de paraffine sont réalisées avec un microtome permettant d'obtenir des tranches de section (coupes histologiques) de 2 à 5
Microtomie et préparation de coupes en paraffine
Le Leica Paraffin Tape-Transfer SystemTM est recommandé pour obtenir des coupes à partir de blocs difficiles pour lesquels la fixation le traitement ou l'
PRÉPARATION DE TISSUS POUR INCLUSION ET COUPE
COUPE PARAFFINE. Nous prenons les échantillons déjà fixés et en cassette dans l'alcool. À préparer avant tout prélèvement : - Les tissus seront fixés
Aperçu des principales colorations histologiques et intérêt pour le
Les coupes du bloc de paraffine sont réalisées avec un microtome permettant d'obtenir des sections (coupes histologiques) de 3 à 5 microns d'épaisseur. Les
Les techniques de préparation des coupes pour les microscopies
3- Déshydratation (Alcool et Toluène). ? 4- Inclusion (paraffine
08.03.006 f2.0 Sectionnement des tissus enrobés de paraffine et d
1 jui. 2012 Les coupes tissulaires sont montées sur des lames pré-refroidies en retournant la lame avec un petit angle par-dessus la coupe comme s'il s' ...
TP 7 Histologie Les techniques de MO et de ME sont utilisées en
étapes successives : fixation inclusion
Présentation PowerPoint
une coupe suffisamment fine d'un bloc de tissu en paraffine pour être observée « in fine » sur lame au microscope. La coupe est une étape fondamentale.
FICHE TECHNIQUE TP HISTOLOGIE - PREPARATION DUNE
prélevée est rigide en présence de paraffine solide dans l'espace intracellulaire de chaque cellule composant le tissu. OU. 7. Confection des coupes
Préparation des tissus : information générale
Préparation des tissus : information générale. Tissus inclus dans la paraffine. - Technique solidifiant les tissus et permettant de confectionner des coupes
UNE MÉTHODE DlMPRÉGNATION ARGENTIQUE RAPIDE SUR
SUR COUPES A LA PARAFFINE DU TISSU NERVEUX DE Débarassez la coupe de 10 µ de la paraffine par la méthode usuelle c'est-à-dire xylol/alcool.
Actualisation de la technique complète des coupes à la paraffine
qui améliore la facilité de coupe et l’adhérence de la pièce au bloc de fixation (avec mon vieux micro-tome les résultats sont nettement améliorés) Paraffine : 100 g - cire d’abeille : 5 g L‘imprégnation Le remplacement de l’alcool par la paraffine doit se faire lentement
Coupes à la Paraffine
NIST Technical Series Publications
Quels sont les différents types de paraffines ?
Il existe différentes qualités de paraffines qui se différencient par leur point de fusion. Le Paraplast est une paraffine synthétique qui imprègne bien les pièces. Régler la température du bain de paraffine en fonction de ce point de fusion (45-70°) La durée de l'inclusion dépend de la taille de la pièce .
Comment faire des coupes en paraffine ?
Pour les échantillons enrobés en paraffine, les coupes obtenues sont d’abord placées dans un bain-marie (dépliement du tissu) puis retirées de l’eau, placées sur une lame et mises à sécher. Stockage : Température ambiante Equipements disponibles sur la plateforme : 2 RM2245 (Leica) & 1 HM350 (MMFrance) Microtomes à congélation
Quelle est l'épaisseur d'une coupe ?
L'épaisseur de ces coupes se situe aux alentours de 4 µ . A cette épaisseur, la résistance des tissus à la pression de l'arête de l'instrument coupant n'est pas suffisante et entraîne des détériorations qui rendent inexploitables les observations qui en résultent.
Quelle est la différence entre l’alcool et la paraffine ?
NB : Il faut se souvenir que si l‘alcool a déjà servi plusieurs fois, la partie inférieure du flacon contient un alcool moins titré. LA PARAFFINE du commerce se présente souvent en granulés, et son point de fusion est toujours pré-cisé (entre 45 et 70°). Le Paraplast est une paraffine de synthèse qui imprègne bien les pièces.
PRÉPARATION DE TISSUS POUR INCLUSION ET COUPE PARAFFINE Nous prenons les échantillons déjà fixés et en cassette dans l'alcool. À préparer avant tout prélèvement : - Les tissus se ront fixés, immédiateme nt après prélèveme nt, dans un fixateur. Pour cela, préparer des récipients (de type pilulier, petit bécher...) contenant le fixateur de votre choix, dont le volume correspond à 10 fois celui de l'échantillon. Fixateurs les plus couramment utilisés : - Formaldéhyde 36% dilué ex-temporanément à 4% dans du PBS 1x. Se conserve à température ambiante pour éviter tout précipitat. - VWR, Rèf : 20910.294, formaldéhyde 36% en solution aqueuse - - Formaldéhyde 4% déjà tamponnée. Se cons erve à température ambiante. VWR, Rèf : 9713.1000, formaldéhyde 4% (m/v) en solution aqueuse, tamponné TECHNICAL. Procédure de prélèvements: 1- Prélever rapidement les organes. La bonne conservation d'un tiss u n'excédant pas 10minutes. Travailler sur aluminium et sans lumière directe pour éviter le dessèchement du tissu. 2- Le plonger immédiatement, et en entier, dans le fixateur en veillant à ce qu'il n'adhère pas au fond ni aux parois du récipient (agitation possible). 3- Laisser incuber dans le fixateur à 4°C, 24 h. 4- Après 24h, sortir l'organe du fixateur. Eliminer le fixateur avec les déchets chimiques. 5- Mettre en cassette : de préférence un échantillon par cassette, en particulier pour les gros tissu. 6- Plonger les cassettes dans un récipient fermé d'éthanol 70°, toujours 10 fois le volume des prélèvements, une heure minimum jusqu'à plusieurs jours. 7- Apporter votre récipie nt d'alcool c ontenant les cassettes a vec la fiche " De mande d'inclusion et/ou coupes paraffine » correctement remplie et que vous nous aurez également envoyée par mail. Nous procédons à l'inclusion en paraffine et l'orientation des tissus. Bien indiquer l'orientation sur le formulaire de demande.
PRÉPARATION DE TISSUS CONGELÉS POUR COUPE CRYOSTAT À préparer avant tout prélèvement : - Les tissus prélevés seront congelés et enrobés dans l'O.C.T. - Préparer de la carboglace. - Préparer un récipient avec un fond d'azote liquide - Après avoir pris soin d'indiquer les références sur les cassettes d'inclusion. Procédure de prélèvements : 1- Prélever rapidement les orga nes. La bonne conservation d'un ti ssu n'excédant pas 10 minutes. Travailler sur aluminium et sans lumière directe pour éviter le déssèchement du tissu. 2- Poser les échant illons dans la cassette d'inclusion contenant l'OCT, e n les orienta nt correctement. Exemple : Coupe transversale de muscle : le muscle sera monté perpendiculairement au fond de la cassette. 3- À l'aide d'une pince solide, attraper la cassette et la plonger dans l'azote liquide et laisser congeler une minute. 4- Mettre les tissus montés dans le récipient conservé dans la carboglace. 5- Stocker à -80°C jusqu'à utilisation. 6- Amener vos échantill ons à la plate-forme, les transport er en CARBOGLACE UNIQUEMENT accompagnés de la fiche " Demande de coupes cryostat » corre cteme nt remplie et que vous nous aurez également envoyée par mail. Remarque : La codification des échantillons, sur la fiche mais aussi sur la cassette, se fait selon une codification bien précise (voir documentation). Pour une demande de coloration, d'immunomarquage ou d'hybridation in situ sur ces mêmes lames, ne pas oublier d'apporter en même temps la fiche correspondant à ces applications correctement remplie et envoyée préalablement par mail.
NomOrientation
de l'inclusionEpaisseur de
coupesNb coupes/
lamesNombre de
lames NomEpaisseur de
coupesNb coupes/
lamesNombre de
lamesResponsable du projet
N° de téléphone
Département- nom / N° équipe
Adresse mail
DEMANDE INCLUSION ET/OU COUPES PARAFFINE
Nombre de cassettes données:
Nature de l'échantillonRemarques
Nature de l'échantillonRemarques
FORMULAIRE DE DEMANDE D'INCLUSION ET COUPE
Apportez cette feuille en même temps que les lames et envoyez-nous le fichier à l'adresse: francoise.gaudin@u-psud.fr
Nom et prénom du demandeur
Nombre d'échantillons donnés:
DEMANDE DE COUPES CRYOSTAT
N° lameColoration demandée
Signature:
Département- nom / N° équipe
Nombre de lames données:
Nature de l'échantillon (+ paraffine ou cryostat)Remarques
FORMULAIRE DE DEMANDE DE COLORATION
Apportez cette feuille en même temps que les lames et envoyez-nous le fichier à l'adresse: francoise.gaudin@u-psud.fr
Nom et prénom du demandeur
Adresse mail
Responsable du projet
N° de téléphone
Rendu le:
N° lameMarquage demandée (Anticorps)Fluo (Alexa 488/Alexa 594) Visible (DAB/AEC)Signature:Rendu le:
FORMULAIRE DE DEMANDE D'IMMUNO-MARQUAGE
Apportez cette feuille en même temps que les lames et envoyez-nous le fichier à l'adresse: francoise.gaudin@u-psud.fr
Nom et prénom du demandeur
Adresse mail
Responsable du projet
Département- nom / N° équipe
Nombre de lames données:
Nature de l'échantillon (+ paraffine ou cryostat)Remarques (Ex :
pour fluo montageDAPI ou non)
N° de téléphone
N° lameMarquage demandée (Sondes)
Signature:
FORMULAIRE DE DEMANDE D'Hybridation in Situ
Apportez cette feuille en même temps que les lames et envoyez-nous le fichier à l'adresse: francoise.gaudin@u-psud.fr
Nom et prénom du demandeur
Nombre de lames données:
Nature de l'échantillon (paraffine)Remarques
Adresse mail
N° de téléphone
Responsable du projet
Département- nom / N° équipe
Rendu le:
quotesdbs_dbs11.pdfusesText_17[PDF] huile de paraffine
[PDF] argumenter un texte seconde
[PDF] graphique proportionnel
[PDF] coefficient de proportionnalité
[PDF] exemple de situation de proportionnalité
[PDF] exemple de proportionnalité dans la vie courante
[PDF] exemple de non proportionnalité
[PDF] réponse négative candidature spontanée
[PDF] navigateur portugais du xv siecle 3 lettres
[PDF] le temps de la révolution et de l'empire cm1
[PDF] évaluation révolution industrielle cm2
[PDF] le temps de la république
[PDF] de la restauration au second empire cm2 evaluation
[PDF] la france de 1815 ? 1870 la classe de stef
