4. CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE
• la chromatographie de partage est la technique de chromatographie liquide la plus chromatographie en phase inverse. • 4 solvants sont utilisés pour ...
LES CHROMATOGRAPHIES
La chromatographie de partage fonctionne par partage de solutés entre deux phases non La chromatographie sur colonne présente plusieurs inconvénients :.
TECHNIQUES: Principes de la chromatographie
La chromatographie d'adsorption est basée sur le partage des solutés entre l'adsorbant solide fixe et la phase mobile. Chacun des solutés est soumis à une force
Extraction et séparation de la chlorophylle
Il servira à la chromatographie de partage sur colonne. On obtient de la chlorophylle pure collée au fond de l'Erlenmeyer. • Resolubiliser la chlorophylle
Amélioration instrumentale de la chromatographie de partage
3 mai 2018 Pour cela nous proposons d'introduire la chromatographie liquide-liquide ou chromatographie de partage centrifuge dont le principe sera décrit ...
Les techniques Chromatographiques 1.1. Introduction 1.3. Historique
La chromatographie de partage : C'est une chromatographie liquide-liquide. D. 2. Le Principe de la chromatographie d'exclusion. Cette technique permet la ...
APPLICATIONS DE LA CHROMATOGRAPHIE DE PARTAGE SUR
guide dans son isolement par Chromatographie de partage sur colonne d'ami- don. La figure 6 reproduit le chromatogramme en deux dimensions (réalisé. Page 17
Master de lInstitut Supérieur des Sciences Agronomiques
Chromatographie de partage centrifuge (CPC). 2.1. Principe. La Chromatographie de partage centrifuge est une technique de chromatographie liquide-liquide sans
CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE - Académie des Sciences et Lettres
Représentation schématique des interactions mises en jeu dans la chromatographie en phase inverse. Le coefficient de distribution (ou coefficient de partage)
GRADIENT DE POLARITE EN CHROMATOGRAPHIE DE
de partage de BERGSTR~I
[PDF] TECHNIQUES: Principes de la chromatographie - Eli Zysman-Colman
La chromatographie d'adsorption est basée sur le partage des solutés entre l'adsorbant solide fixe et la phase mobile Chacun des solutés est soumis à une force
[PDF] La chromatographiepdf
Principe La chromatographie repose sur l'entraînement d'un échantillon dissous par une La phase stationnaire en chromatographie de partage doit être
[PDF] NOTIONS FONDAMENTALES DE CHROMATOGRAPHIE
On distingue deux types de chromatographie: sur colonne et planaire CLPgreffée Groupemt lié chimiquement à un gel Partage entre liq et surface
[PDF] 1 Définition 2 Buts de la chromatographie 21 Objectif analytique
C'est une méthode de séparation non destructrice en son principe substrat agissant par partage (chromatographie liquide - liquide : CLL)
[PDF] CHROMATOGRAPHIE - AC Nancy Metz
Chromatographie en phase gazeuse (CPG): Le principe de la séparation par C P G consiste à partager l'échantillon à analyser entre deux phases L'une de ces
[PDF] Chromatographie - L3 Chimie Dijon
Le principe repose sur l'équilibre de concentrations des composés présents La chromatographie liquide-liquide (CLL) ou chromatographie de partage :
[PDF] LES CHROMATOGRAPHIES
la chromatographie de partage (LLC GLC) lorsque la phase stationnaire est un imprègne un support en principe inerte ou est greffée par liaison
[PDF] HPLC Principe et appareillage
20 jan 2010 · La chromatographie permet la séparation ou la purification d'un ou de rapport à l'équilibre est appelé coefficient de partage K
[PDF] LES CHROMATOGRAPHIES
La chromatographie de partage fonctionne par partage de solutés entre deux phases non miscibles ; l'une mobile et l'autre stationnaire La phase stationnaire
[PDF] 4 CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE
La chromatographie de partage convient très bien à la séparation de molécules très polaires de masses moléculaires inférieures à 3000 et aux homologues d'une
cours sur le chapitre 3: Chromatographie de partage
Principe de la chromatographie de partage La phase stationnaire et la phase mobile sont liquides Elle est basée sur la différence de solubilité du soluté
[PDF] La chromatographiepdf
Principe La chromatographie repose sur l'entraînement d'un échantillon dissous par une La phase stationnaire en chromatographie de partage doit être
[PDF] TECHNIQUES: Principes de la chromatographie
La chromatographie d'adsorption est basée sur le partage des solutés entre l'adsorbant solide fixe et la phase mobile Chacun des solutés est soumis à une force
[PDF] [PDF] Cours de Chromatographie
Chromatographie gazeuse : principe et appareillage Adsorption ? Partage ? Paires d'ions ? Échange d'ions ? Exclusion stérique
Chromatographie de partage - Wikipédia
La chromatographie de partage est une méthode de séparation de molécules par chromatographie suivant leur migration/répartition différentielle dans deux
La chromatographie Planet-Vie
15 mai 2012 · La chromatographie de partage en phase gazeuse utilise comme principe de séparation le partage différentiel des molécules à séparer dans les
[PDF] Chapitre 2 : Chromatographie - opsuniv-batna2dz
? Le principe de la chromatographie consiste à entrainer l'échantillons à l'aide d'un éluant (gazeux ou liquide) appelé phase mobile (PM) qui se déplace au
[PDF] Chromatographie - L3 Chimie Dijon
Principe : Le principe repose sur l'équilibre de concentrations des composés présents entre deux phases en contact : la phase stationnaire et la phase
Quel est le principe de la chromatographie de partage ?
La chromatographie de partage en phase gazeuse utilise comme principe de séparation le partage différentiel des molécules à séparer dans les deux phases stationnaires et mobiles.15 mai 2012Quel est le principe de la chromatographie ?
La chromatographie est une méthode physico-chimique qui sert à séparer les différentes substances présentes dans un mélange (échantillon en phase homogène liquide ou gazeuse).Quel est le principe CCM ?
Principe. ? Une CCM, c'est quoi ? Il s'agit d'une technique d'analyse qui s'appuie sur les différences d'affinités de substances chimiques entre une phase fixe, la plaque, et une phase mobile, l'éluant. Cette différence va permettre la séparation de ces différentes substances sur la plaque.- La CCM se déroule en trois étapes : préparation de la cuve, préparation de la plaque, et élution. Un cuve de chromatographie se compose de la cuve et d'un couvercle.
Chromatographie
Chromatographie
Pr. Franck DENAT
ICMUB UMR 5260
9, Av. Alain Savary
BP 47870 21078 Dijon
Franck.Denat@u-bourgogne.fr
Chromatographie
Chromatographie
I. Généralités.
Méthode de séparation des constituants d'un mélange. Applications: Identification, dosage (quantification), purification.Quelques noms et dates :
- 1903 : mise en évidence par Mikhail TSWETT, botaniste russe - 1931 (KUHN et LEDERER) : chromatographie sur colonne (chromatographie liquide- solide CLS) - 1938 (IZMAILOV et SCRAIBER) : chromatographie sur couche mince (CCM ou TLC), TAYLOR et UREY : chromatographie par échange d'ions - 1941 (MARTIN et SYNGE, Nobel en 1952) : concept de chromatographie gaz-liquide, chromatographie de partage liquide-liquide - 1952 : développement pratique de la chromatographie gaz-liquide - 1955 : 1 er chromatographe gaz-liquide sur le marché (chromatographie en phase gazeuse : CPG ou GC) - 1965 (HALASZ, HORVATH) : Chromatographie Liquide Haute Performance (CLHP ou HPLC)Références :
- F. Rouessac et A. Rouessac. Analyse Chimique. Méthodes et techniques instrumentales modernes, 6ème édition (Dunod) - D.A. Skoog, D.M. West, F.J. Holler. Chimie analytique (De Boeck).I. Généralités.
I. 1. Principe :
Le principe repose sur l'équilibre de concentrations des composés présents entre deux phases en contact : la phase stationnaire et la phase mobile (gaz ou liquide) qui se déplace. La séparation est basée sur l'entraînement différentiel des constituants du mélange. Ces derniers parcourent la phase stationnaire avec des temps proportionnelsà leurs propriétés intrinsèques (taille, structure, ...) ou à leur affinité avec la phase
stationnaire (polarité, ...). K = C S /C MK : Coefficient de distribution
C S : Concentration de l'analyte A dans la phase stationnaire C M : Concentration de l'analyte A dans la phase mobile Chromatographie : partition phase stationnaire - phase mobile Extraction : partition entre deux phases liquides non miscibles Cristallisation : partition entre phase liquide - phase cristalline Distillation : partition entre phase liquide - phase gazeuse Sublimation : partition entre phase solide - phase gazeuse A phase mobile A phase stationnaire I. 2. Classification des méthodes chromatographiques : On distingue les différentes méthodes chromatographiques selon la nature des phases. Phase stationnaire : - dans une colonne au travers de laquelle progresse la phase mobile par gravité ou sous l'action d'une différence de pression G chromatographie sur colonne - sur une surface plane G chromatographie sur couche mince (CCM) Phase mobile : phase qui se déplace sur ou à travers la phase stationnaire, entraînant avec elle l'analyte. Le processus d'entraînement de cet analyte est appelé élution. La phase mobile peut être un liquide ou un gaz.I.2.1. Chromatographies en phase liquide (CPL)
La phase mobile est un liquide. On distingue:
- Les chromatographies de partage : - La chromatographie liquide-liquide (CLL) ou chromatographie de partage :la phase stationnaire est un liquide immobilisé sur un support solide inerte : soit imprégnée
dans un solide poreux (risques de lessivage), soit greffée sur le solide (phase greffée). La séparation repose sur le coefficient de partage du soluté dans les deux phases liquides. - La chromatographie d'exclusion, ou perméation de gel, ou tamisage moléculaire : la phase stationnaire est un solide poreux : les grosses particules sont exclues de la phase fixe, les petites particules incluses diffusent dans les pores du gel et sont donc retardés. -Les chromatographies d'adsorption : - La chromatographie liquide-solide (CLS) ou chromatographie d'adsorption (la plus ancienne et la plus générale) : la phase stationnaire est un adsorbant solide polaire (silice ou alumine) : chromatographie sur colonne ou CCM. L'analyte adhère à la phase stationnaire par physisorption etchimisorption G coefficient d'adsorption. La phase stationnaire peut être modifiée pour être
apolaire : chromatographie d'adsorption en phase inverse. -Les chromatographies d'adsorption : - La chromatographie par échange d'ions ou chromatographie ionique : la phase stationnaire est une résine échangeuse d'ions (polymère porteur de groupements ionisés, négativement pour séparer des cations, positivement pour séparer des anions) : interactions électrostatiques. - La chromatographie d'affinité : la phase stationnaire est ici un substrat inerte sur lequel est greffé un "effecteur" quiprésente une affinité pour un soluté de l'échantillon à analyser (affinité enzyme-substrat,
ligand-récepteur, antigène-anticorps).I.2.2. Chromatographies en phase gazeuse (CPG)
La phase mobile est un gaz vecteur. On distingue : - chromatographie de partage : - La chromatographie gaz-liquide : la phase stationnaire est un liquide immobilisé sur un support solide par imprégnation ou par greffage. - chromatographie d'adsorption : - La chromatographie gaz-solide : la phase stationnaire est un solide poreux, réservé à l'analyse de mélanges de gaz ou de liquides à bas points d'ébullition. Eventuellement, la phase mobile peut être un fluide à l'état supercritique (ex CO 2à 50°C et
150 bars)
I.3. Choix de la technique :
Les différentes techniques sont complémentaires plutôt que concurrentes.Le choix de l'une ou l'autre dépend :
- de la nature du soluté : gaz, liquide volatil, liquide peu volatil, solide, macromolécule, espèce organique, polaire, ionique,... - du but de l'analyse : identification de composants d'un mélange, nécessité ou non de "coupler" la chromatographie avec une méthode spectroscopique ou avec la spectrométrie de masse (CPG/SM ou GC/MS), contrôle de pureté, purification de produits (colonnes préparatives), suivi de réaction en continu pour optimiser des paramètres, dosages (quantification)...II. Chromatogramme.
Diagramme montrant l'évolution du signal du détecteur (÷ à la concentration en soluté) en
fonction du temps d'élution (plus rarement du volume d'élution)Chromatogramme :
Elution : entraînement d'un soluté à travers la phase stationnaire par le mouvement de la phase mobile. En CLS (colonne ou CCM), la phase mobile peut être appelée éluantL'analyse du chromatogramme permet une analyse :
-qualitative : identification / position du pic -quantitative : aire des pics t 0 : début de l'injection V m : volume mort de la colonne t m : temps mort V e : volume d'élution ( de rétention, V r d'un composé t r : temps de rétention ( d'élution, t e ) d'un composé V e (volume d'élution) = d (débit) x t (temps) V e ' : volume d'élution réduit (V e = V e ' + V m t r ' : temps de rétention réduit (t r = t r ' + t m W b : largeur du pic à la base (ω) W h : largeur du pic à mi-hauteur (δ) Facteur de rétention (ou facteur de capacité) k : k = = t r t m t r -t m t m k = = = m S m M C S V S C M V M V S V M KK : coefficient de distribution
m S : masse de soluté dans la phase stationnaire m M : masse de soluté dans la phase mobile Idéalement 1Approche ancienne mais toujours utilisée : le phénomène de migration qui est en réalité
dynamique et continu est considéré comme une suite d'étapes distinctes (équilibres successifs). On considère alors qu'une colonne de longueur utile L est composée de N petits disques fictifs superposés (plateaux théoriques) de même hauteur H. H = L NL : longueur utile de la colonne
N : nombre de plateaux théoriques : 100 - 10
6 H : hauteur équivalente à un plateau théorique (HEPT) : 1 cm - 10 µm Une colonne sera d'autant plus efficace que N est grand (L grand) et H est petit.On peut montrer que :
2 L Lω 4t RH = et σ =
Donc H =
Lω 2 16tquotesdbs_dbs4.pdfusesText_8[PDF] chromatographie sur colonne
[PDF] avantages inconvénients chromatographie ionique
[PDF] electrophorese
[PDF] chromatographie d'exclusion
[PDF] chromatographie d'exclusion stérique polymère
[PDF] chromatographie gel filtration
[PDF] chromatographie d'exclusion stérique exercice
[PDF] chromatographie dexclusion exercice corrigé
[PDF] volume hydrodynamique
[PDF] chromatographie par perméation de gel (gpc)
[PDF] exercice chromatographie corrigé pdf
[PDF] qcm sur la chromatographie
[PDF] qcm chromatographie chimie analytique
[PDF] qcm chromatographie phase gazeuse