LE GENIE GENETIQUE ET LE CLONAGE DADN
Il existe 3 types de vecteur de clonage : plasmidiques viraux et cosmides (phage associés à des plasmides). Les-vecteurs plasmidiques de première génération
Génie Génétique
1.Vecteur de clonage : renferme une origine de réplication et permet de cloner un segment d'ADN ou un gène qui y est intégré.
Cours de Biologie Moléculaire et Génie Génétique
Vecteur de clonage: Elément génétique capable de se répliquer et permettant le transfert dans une cellule réceptrice d'un fragment d'ADN étranger préalablement
SUPPORT DE COURS de - GENIE GENETIQUE
Le plasmide pBR 322 de 4361 pb de taille est l'un des 1ers plasmides artificiels utilisés comme vecteur de clonage. Il possède 2 gènes de résistance aux
Génie génétique.pdf
pUC appelés (les vecteurs de clonage de secondes génération). • Les vecteurs de clonage de seconde génération ce sont des petits plasmides d'environ 2700pb. Le
GENIE GENETIQUE
Ce sont des vecteurs permettant de cloner de grands fragments d'ADN (100 à 300 kb) dans les cellules d'E. coli. Ce sont des ADN circulaires dont l'origine de
Les enzymes « outils » du génie génétique
Le gène d'intérêt cloné dans un vecteur d'expression doit donc être cloné après un promoteur spécifique pour l'ARN polymérase présente dans la cellule hôte. On
hotes de clonage - Génie Génétique
Exemple : si le vecteur est un plasmide la cellule hôte est une bactérie. La cellule hôte ne doit pas modifier ou détruire l'ADN recombiné. Page 4. HOTES
Génie génétique
Le génie génétique est un ensemble de techniques de les enzymes du génie génétique ... pUC appelés (les vecteurs de clonage de secondes génération).
Exposé réalisé par:
Les plasmides vecteurs de clonage par génie génétique à des fins de clonage ... sur le génie génétique qui regroupe les techniques permettant de.
Dr ABDI Meriem
Géniegénétique, Licence 3 Biochimie
COURS 5:
CLONAGE ET VECTEURS DE CLONAGE
République Algérienne Démocratique et Populaire Université des Sciences et de la Technologie dOran Mohamed BOUDIAF Département de Génétique Moléculaire et AppliquéeCLONAGE MOLECULAIRE
obtenirplusieurscopies. vecteur.CLONAGE MOLECULAIRE
1.UnVecteurCirculaire
Linéaire
2.UneCellulehôteProcaryote
Eucaryote
3.UnfragmentADNgénomique
ADNcomplémentaire
ÉLÉMENTS NÉCESSAIRES
CLONAGE MOLECULAIRE
cerevisiae. plusieurscopiesduvecteurrecombiné.CLONAGE MOLECULAIRE
CLONAGE MOLECULAIRE
CATEGORIES DE VECTEURS
ouungènequiyestintégré.VECTEUR DE CLONAGE
CHOIX DU VECTEUR DE CLONAGE
Lechoixvecteurdeclonagedépendde:
PROPRIÉTÉS DES VECTEURS DECLONAGE
1.Réplication autonome et hôte.
2. Petite taille:étranger
3. Présence de gènes de sélection:sélection des cellules hôtes qui ont intégré un vecteur.
PROPRIÉTÉS DES VECTEURS DECLONAGE
4. Présence de sites de restriction localisés dans les gènes de sélection:permet de
sélectionner les cellules hôtes qui ont intégré un vecteur recombinant.5. Stabilité: maintient sans modification dans la cellule hôte, quel que soit le nombrede
division.VECTEURSHOTEINSERT (Kb)
1.PlasmidesBactérie10
2.Phage lambdaBactérie25
3. CosmideBactérie45
4.YAC (yeast artificial chromosome)Levure1000
5.BAC (bacterial artificial chromosome)Bactérie300
EXEMPLES DE VECTEUR DE CLONAGE
MoléculedADNdoriginebactérienne
1. LES PLASMIDES
1. LES PLASMIDES
1. LES PLASMIDES
Ildesplasmidessuivants:
ColE1RSF2124
pSC101LES PLASMIDES
Desplasmidesartificiels.
LES PLASMIDES pBR
lamplicilline. surlesdeuxgènesderésistance.Ontunetaillequiavoisine2,6Kb.
LES PLASMIDES pUC
Polylinker
pUC 9ACGCCAAGCTTGGCTGCAGGTCGACGGATCCCCGGGAATTCACTGPolylinker
dupolylinker.LES PLASMIDE pUC
2.LES PHAGES
membraneentourantunADNsimplebrinde6,4kb.2.LES PHAGES
Découvert par E.M. Lederbergen 1950.
Deux parties sont individualisées dans le phage lamba:1. La tête du virus: Elle renferme lADN viral (ADN double brin de 48 kb).
2. La queue du virus: Elle permet la fixation du virus sur la cellule hôte bactérienne.
lunecomplémentaireàlautre. Leurs association donne une structure circulaire à lADN dans la cellule hôte.PHAGES Ȝ
PHAGES Ȝ
intégré se recombine avec le chromosome bactérien. L'intégration peut ensuite entraîner soit une réponse lysogénique, soit une réponse lytique. Une réponse lysogéniquepas toujours de conséquence sur la vie de la cellule.PHAGES Ȝ
PHAGES Ȝ
delabactérieinfectée.PHAGES Ȝ
COSMIDE
leurADNcirculairecequipermettraaucosmide empaquetédanslatêteviruslambda.Intègreenviron40kbétranger.
COSMIDE
COSMIDE: ETAPE DEMCOMPAQUETAGE 1
latêteduphagelambda. restriction. coupésaveclamêmeenzyme. antibiotiques,codésparleplasmide. YACChromosomeartificielconstruitinvitro
Peutporterdesinsertsallant2000kb.
régulatrices. YACUnvecteurYACcontient:
3-DessitesderestrictionSmaIetBamHI
4-Unmarqueurdesélectionà(AmpR)
CLONAGE DANS UN VECYEUR YAC
Une digestion par BamHIet EcoRIlibère trois
fragments : lun contient h+, ARS et CEN ainsi quun télomère, le second contient u+ et un télomère et le troisième uniquement h+. Ces fragments de tailles différentes peuvent être séparer par électrophorèse sur gel dagaroseCLONAGE DANS UN VECYEUR YAC
extrémitéscohésivescompatibles. BAC sontactuellementpresqueplusutilisés.LesBACsontdesADNcirculaires,commeun
chromosomebactérien,dontde réplicationestissuedesexuelF bactérienne). BACLevecteurBaccontient:
1-OriS:originederéplicationdeF.
correcteduplasmidedanslescellulesfilles.3-LegènerepEcodederéplicationde.
blanc/bleu5-CmRplasmidiquecodelarésistanceau
chloramphénicol.quotesdbs_dbs1.pdfusesText_1[PDF] les vents qui soufflent au sénégal
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