FICHE TECHNIQUE TP HISTOLOGIE - PREPARATION DUNE
PREPARATION D'UNE LAME HISTOLOGIQUE -. OBJECTIFS SPECIFIQUES : la confection des coupes histologiques comporte alors 3 étapes :.
Université Frères Mentouri Constantine 1 1ère année LMD / TC / SNV
1- Préparation des coupes pour observation au microscope optique. Pour l'étude histologique classique la préparation des coupes fines se fait en plusieurs
TP 7 Histologie Les techniques de MO et de ME sont utilisées en
diverses (préparation des échantillons) que l'on applique au matériel. étapes successives : fixation inclusion
MODULE 1 – Introduction Comment préparer un prélèvement de
Dans cette vidéo nous allons parler d'aspects plus techniques liés à l'histologie. Savez-?vous comment on obtient une lame histologique comme celle-?ci?
PREPARATION DUNE LAME HISTOLOGIQUE
Service d'Histologie & Embryologie. 1ère année de médecine. Module d'Histologie. Berrada S.M.. 1. - PREPARATION D'UNE LAME HISTOLOGIQUE -.
Réalisation dune coupe de racines et schéma dhistologie végétale
préparations histologiques de racines jeunes. ? Réalisation d'une coupe de racines coloration au carmin-vert d'iode : protocole. • Réaliser des coupes
Segmentation des Coupes Histologiques Osseuses Par la Ligne de
Résumé: La coupe histologique osseuse est une lame qui présente la structure interne de l`os a l`échelle microscopique. Le screening (étape de lecture d'une
MEMOIRE DE FIN DETUDES
1 juil. 2017 Figure 33 : coupe histologique du tissu pulmonaire atteindre l'hydatide ... Techniques de préparation des coupes histologiques…………………...27.
Préparation des tissus : information générale
Plateforme d'Histologie IRIC – Local 3440. Préparation des tissus : information générale. Tissus inclus dans la paraffine.
Les techniques de préparation des coupes pour les microscopies
Le plus souvent le matériel histologique (= cellules contenues dans un tissu) est fixé
Chapitre II : Méthodes d’étude de la cellule TD N°2
Pour l’étude histologique classique la préparation des coupes fines se fait en plusieurs étapes : a) Prélèvement Le prélèvement effectué sur un organe doit se faire aussi délicatement que possible afin de ne pas meurtrir les tissus Une fois obtenu ce prélèvement doit immédiatement être immergé dans un
Coupes histologiques - HISTOMICS
fixer à une molécule (antigène) de la coupe histologique Ces anticorps produits chez l’animal à partir de la protéine purifiée est couplé à: une enzyme (peroxydase) qui catalyse une réaction avec production de couleur un marqueur (fluorophore) le plus souvent fluorescent On parle alors d’immunofluorescence
Chapitre II : Méthodes d’étude de la cellule TD N°2
ainsi une préparation histologique prête à être observée au microscope optique 2- Préparation des coupes pour observation au microscope électronique [Figure 2] La séquence de manipulation est analogue à celle qui a été exposée pour la microscopie optique a) Fixation
1 Méthodes d'études en histologie - editions-ellipsesfr
B La congélation permet la conservation de pièces histologique qui pourront servir plusieurs années après encore à des études moléculaires et enzymatiques C Une coupe et une coloration par l’hématéine éosine safran (HES) peuvent être réalisées sur un bloc de tissu fixé par le liquide de Bouin inclus en
Comment faire une coupe histologique ?
La préparation d’une coupe histologique consiste à réaliser des sections, c’est-à-dire des tranches très fines de tissus destinés à être observés par transparence au microscope. Les coupes à congélation présentent certains avantages que la technique en paraffine n’offre pas : la congélation permet une conservation optimale de l’ADN et de l’ARN.
Qu'est-ce que l'orientation des coupes histologiques?
Par exemple, on utilise cette terminologie pour indiquer l'orientation des coupes histologiques ou des vues utilisées dans les schémas et images en médecine ou en biologie humaine à partir de la position de Poirier, c'est-à-dire lorsque le sujet est debout face à l'observateur [ réf. souhaitée] .
Quelle est la différence entre la technique histologique et la technique des coupes minces?
Technique des coupes minces et coloration positive La technique des coupes minces et coloration positive Le principe et le procédé sont les même que pour la technique histologique la différence est dans les produits et les outils utilisés
Quels sont les 4 étapes d’une démarche histologique?
Toute activité histologique a en commun l’action de voir (observer) et d’interpréter ce qui est vu. Dans toute démarche d’ordre histologique, 4 étapes se succèdent : 1) le choix du matériel à étudier, 2) la technique permettant de visualiser les structures ou les phénomènes que l’on veut étudier, 3) la production d’images de ces structures ou de...
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2 Danscettevidéonousallonsparlerd'aspectsplustechniquesliésàl'histologie.Savez-vouscommentonobtientunelamehistologiquecommecelle-ci?Etbienpourledécouvrirouleredécouvrir,jevousproposederejoin dreunl aboratoired'analyse safindecompre ndrecommentlestissusbiologiquessonttraitéspourpréparerleslameshistologiquesquiserontobservéessouslemicroscope.NousvoicidanslelaboratoirededermatopathologieducentrehospitalieruniversitairedeLiège.Ici,plusieurscentainesdelameshistologiquessontpréparéeschaquejouretnousallonspouvoirobserverchaqueétapedecettepréparationminutieuse.Lapremièreétapedeceprocessusestleprélèvementquiconsisteàobtenirunéchantillondetissusenlecoupanthorsd'unorganeoumêmeàpréleverunorganeentier.Enclinique,unfragmen td'organeestprélevé lorsd'uneendoscopieo ulorsd' uneinterventionchirurgicale.Onparlerespectivementdebiopsieoudepièceopératoire.Deséchantillonsdetissuspeuventaussiêtreprélevéssurdescadavreslorsd'autopsies.Danslelaborato ire,les prélèvementsreçussontanalysés macroscopiq uementet,sinécessaire,ilssontrecoupéspourobtenirdespiècesdepetitetaille,d'environ1à2cm2,quisontalorsdéposéesdansdescassettesd'inclusionenplastiqueservantdecontenantpourlasuitedelamanipulation.Afindeconserverlestissusprélevésdansunétatprocheduvivant,ilssontfixéstoutdesuiteaprèsleprélèvementàl'aided'unesubstancechimiquequel'onappellelefixateur.Généralement,ils'agitdeformoloudeparaformaldéhydeàdesconcentrationsdéterminéesmaisd'autrestypesdefixateurspeuventaussiêtreutilisés,celadépendprincipalementdutyped'examenàeffectuerparlasuitesurletissumaisaussidutempsdisponiblepourlafixation.Eneffet,laduréedelafixationvarieselonlatailleduprélèvement.Atitred'exemple,lavitessedepénétrationduformoldanslestissusestde1millimètreparheure.Lesintérêtsdelafixati onsontmultiples:immo bilisationdesconstituantstissulairesetcel lulaires,préventiondel'autolysecellulaireetdelaputréfactionbactériennepost-mortem.Pourpouvoirobserverlestissusaumicroscope,ilfautréaliserdefinestranchesrégulièresdansleprélè vement.Po uryparvenir,celui-cidoitavo irunecons istancesolide,c 'estpourquoiilestinclusdansdelaparaffine.C'estcequel' onappelle laphased'in clusionquies tgénéralementréalisée dansun automate.Laparaffineétanthydrophobe,lestissusdoiventêtrepréalablementdéshydratéspardespassagessuccessifsdansdesbainsd'alcooldeconcentrationcroissante,puisdansun
3solvantdanslequellaparaffineestmiscible,parexemplelexylèneouletoluène.Acestade,leprélèvementdevienttransparent,c'estlaclarification.Alafindel'étaped'inclusion,lesprélèvementssontplongésdansdesbainsdeparaffineliquidequioccuperatouslesespacesvidesdansletissu.Alasortiedel'automate,leprélevementestsortidesacassetted'inclusionetdéposédansunmoulequipeutêtreremplideparaffine,c'estlaphased'enrobage.Enrefroidissant,laparaffinedurcira,cequiformeraunblocdanslequell'échantillondetissusestinclusetquipourraêtrecoupéenfinestranchesquel'onappelledescoupes.Parfoisunexamentrèsr apidedes tissusestnécessai re,parexemp lepourunexamen extemporanéc'est-à-direpourguide rlechirurgie nensalled'opération. Danscec as,leprélèvementestfixépuiscongeléetinclusdansunmélangehydrosolubledeglycolsetderésinespourréaliserlescoupes.Cettetechniquepermetd'écourterleprocessusenévitantlesétapesd'inclusionetd'enrobageenparaffine.Silepré lèvement aétéinclusdanslaparaf fine, leblocestalorscoupéàl'ai ded'un microtome.Sileprélèvementaétécongelé,lescoupessontréaliséesdansuneenceinteréfrigéréeàl'aided'unemachineappeléecryostat.Lemicrotomeetlecryostatsontdesappareilsmunisd'unelameaiguiséequipermettentd'obtenirdescoupesdetiss usfines,de 2à5micromètresd'é paisseur. Audelàde5micromètres,ilestdifficiled'observercorrectementleprélèvementaumicroscopecarlescouchesdetissussesuperposent.Lesfinescoupesréaliséessontensuitedéposéessurdeslamesdeverrepuisséchéesafind'adhérerparfaitementàlalame.Dansleslaboratoiresd'analysecommecelui-ci,c'estunautomatequisechargeradelasuitedesétapesdelapréparation.Lescoupesyserontdéparaffinéesetréhydratéesparpassagessuccessifsdansdesbainsd'alcooldemoinsenmoinsconcentréetenfinparpassagedansunbaind'eaupourpouvoirêtrecolorées.Puisquelestissusdel'organismenesontpasspontanémentcolorés,ilsserontnaturellementmalvisibl es,c'estpourquoionutilisee nhistologiede scolorantsquipermettentleur observationaumicroscope.Laplupartsontdescomposantsacidesoubasiquesenmilieuaqueuxquiinteragissentaveclesradicauxionisésdestissus.Lacolorationlapluscourammentutiliséeestl'hématoxyline-éosine.Cettecolorationestlatechniquedecontrastefondamen talepourto utexamenmicroscopiqu ehistologiqueconventionnel.L'hématoxylineestuncolorantbasique,quisefixeauxacidesnucléiquesetcoloreainsilesnoyau xcellulaireset leréticulum endoplasmiquerug ueuxenviolet.Au
4contraire,l'éosineestunco lorantacide,quisefixeaux protéines etdoncc olorelecytoplasmeetlesfibresenrose.Uneautrecolorationfréquenteestl'hématoxyline-éosine-safran,cederniercolorantauneaffinitéaveclesfibresdecollagènedelamatriceextracellulairedestissusetpermetdoncdemettrecesfibresenévidence.Lacolo rationtrichromedeMassone stelleaussicl assiquemen tutiliséeenlab oratoire,surtoutpouridentifierlespathologiesmusculaires,cardiaques,hépatiquesetrénalescarellepermetdebiendifférencierd'unepartlesfibresmusculairesdontlecytoplasmeprendunecolorationrougeetd'autrepartlesfibresdecollagènequisecolorentenvert.Ilexis teévidemmentbien d'autrespossibilitésdecoloratio ndestissusqu evousrencontrerezsurleslameshistologiquesquevousobserverezdansceMOOC.Desréactionschimiquesplusspécifiquespeuventaussiparfoisêtreutiliséespourmettreenévidencecertainesstructures.Prenonsquelquesexemples.Lemucusprésentdanscertainstissuspeutêtrecoloréparexempleàl'aideduBleu Alc ianouduRougeMuci carminqui colorentles mucopolysaccharidesacidesrespectivementenbleuouenrouge.Unautreexempleestceluidelacolorationàl'acidepériodiquedeSchiffquel'onappelleplussouventcolorationPASquimetenévidencelesglucidesparuncolorantrouge-pourpre.Cettecolorati onpermetparexempledemie uxvisualiserleg lycogène oulesmucinescontenusdanscertainescellulesouencoreleslamesbasalesdesépithéliumsquisontrichesenglycoprotéines.Nousévoqueronsaussiplustardlacolorationàl'orcéinequiestunecolorationspécifiquedesfibresélastiquesquel'ontrouvedanslestissusconjonctifs,maisaussil'imprégnationàl'argentquipermetdevisualiserlesfibresdecollagènedetypeIIIappeléesaussifibresréticuléesetfinalementlafixationàl'acideosmiquequipermetdeconserveretvisualiserleslipidesdestissusbiologiques.Finalementd'autrestechniques, ditesd'immunohistoch imie,peuventêtreutiliséespourmettreenévidencedesmotifsantigéniquesprésentsdanslestissus.Ellessontcourammentutiliséesenrechercheetdansleslaboratoiresdediagnostic.Ellesconsistentàutiliserdesanticorpsspécifiquesdemoléculesd'intérêtafind'évaluerleurprésenceetleurrépartitiondansuntissu. Laréactio nantigène-anticorpsestvisualiséeso itparune réactionenzymatiquesoitàl'aidedesub stanceschimiq ues appeléesfluorochromes.Pourlaréalisationdecestechniques,lacongélationdestissusestaussipréférablecarellepermetunemeilleureconservationdessitesantigéniquesdansletissu.Ladernièreétapedelapréparationdeslameshistologiquesestlemontage.Lorsqueletissuaété coloré, ilfautleprotégerparl'ap position d'unerés ineetd'u nelamelledeverre
5couvre-objetoubienparunfilmplastique,commec'estlecasdanscetautomate.Cecipermettradeconserverlalameetdel'observeraumicroscopesansrisqued'abîmerletissu.Voussavezmaintenan tcommenton réalisedeslameshisto logiquesàpartird'un prélèvementdetissu.Pourobserverceslameshistologiques,vouspouvezbiensûrutiliserunmicroscopecommecelui-cimaisdeplusenplusfréquemmentdanslapratiquemédicale,pourlarechercheoudansl'enseignement,commedansceMOOCparexemple,ceslamessontdigitaliséespourpouvoirêtreregardéessurunordinateur.Voyonsenquelquesmotsenquoiconsisteleprocessusdedigitalisation.Ladigitalisation,c'estl'obtentiond'uneimagenumériqueàpartird'unelamehistologiquegrâceàunscannerparticulierdotéd'unmicroscopeetd'unecaméradigitale.Leprocessusd'acquisitiondel'imagedébuteparlechoix,àfaiblegrossissement,delapartiedelalameànumériseretparleréglagedeparamètrestelsquelanetteté.Lanumérisationproprementditepeutalorsavoirlieu.Desmilliersd'imagesdelacoupehistologiquefourniesparl'objectifdumicroscoperégléàl'agrandissementmaximumchoisisontenregis tréesdemanièresérielle,puisregro upéespo urreconstruirelatotali tédel'échantillon.L'observationdeslamesnumériséessefaitsurl'écrand'unordinateuràl'aided'unlogicieldevisualisation,quireproduitlesfonctionsd'unmicroscopeenpermettantdenaviguersurlalameàdifférentsgrossissements.Leslamesscan néesprésentent denombreuxavantagescomme notammentunaccèspartagéentredenombreusespersonnes,uneconsultationàdistanceetàtoutmoment.Ellespermettentégalementdepointercertainesstructuresd'intérêtetd'incorporerdescommentairessurl'image.DansceMOOC,vousaurezdoncunmicroscopevirtuelàvotredispositionaveclequelvouspourrezexploreràvotreguisenoslamesdigitaliséesmaisaussivouslaisserguideràtraverslestissuslelongdeparcoursdequestions-réponsesquenousavonspréparéspourvous.
quotesdbs_dbs32.pdfusesText_38[PDF] technique histologique microscope photonique
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