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20 jan 2010 · La chromatographie en phase liquide a permis de réaliser des analyses qui La phase mobile poussée par une pompe sous haute pression 



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de préférence « de haute performance » [HPLC] Ainsi jusqu'à ces années 1958-1960 la chromatographie en phase liquide sur colonne (CL)



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Liquide : travail en solution Haute performance : Grande efficacité de la séparation CPG : Chromatographie en Phase Gazeuse : ? composés volatils



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une forte pression sur la phase mobile La CLHP Chromatographie Liquide à Haute Performance a donc été longtemps appelée Chromatographie Liquide sous 



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Chromatographie en phase liquide haute pression Anglais LHHHHH HPLC High Performance (or High Pressure) Liquid Chromatography Applications médicales



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analytique la chromatographie liquide à haute performance à polarité de phase inversée (HPLC) L'objectif de cette étude est d'optimiser une méthode de 



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la phase stationnaire est soit un solide soit un liquide (fixé sur un support La chromatographie liquide haute performance est très utilisée dans tous



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La séparation est réalisée sur colonne Xbridge® avec une phase acétate d'ammonium pH 4 / acétonitrile (10/90 v/v) en mode isocratique La détection est réalisée 



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3) Influence du pH de la phase mobile la chromatographie en phase liquide de charge car travailler sous haute pression est toujours synonyme de



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CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE HAUTE PERFORMANCE (HPLC) I) Principe de la chromatographie La chromatographie est une méthode de séparation des constituants d'un mélange même très complexe Il existe trois principaux types de chromatographie: • la chromatographie en phase gazeuse (CPG) • la chromatographie en phase liquide à



Chromatographie en phase liquide à haute performance

La chromatographie en phase liquide à haute performance (CLHP) appelée plus fréquemment par l'abréviation anglaise HPLC ( high performance liquid chromatography ou plus rarement high pressure liquid chromatography ) (voir Figure 1 et 2 à la fin du cours) est une technique



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CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE HAUTE PERFORMANCE (HPLC) I) Principe de la chromatographie La chromatographie est une méthode de séparation des constituants d'un mélange même très complexe La chromatographie en phase liquide a permis de réaliser des analyses qui n'étaient



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la chromatographie en phase liquide à haute performance (CLHP ou HPLC en anglais) ; la chromatographie en phase supercritique ou fluide supercritique (CPS ou SFC en anglais) On peut aussi les nommer selon les interactions développées par la phase stationnaire : la chromatographie chirale (qui est soit de la CPG soit de la CPL) ;

Qu'est-ce que la chromatographie liquide à haute performance ?

La chromatographie liquide à haute performance, souvent appelée du nom de son abréviation CLHP-HPLC en langue anglaise-constitue une technique analytique très générale d'emploi.

Quels sont les composants d’un système de chromatographie liquide haute performance ?

Les composants d’un système de chromatographie liquide haute performance (HPLC) de base sont représentés de manière simplifiée à la figure E. Un réservoir contient le solvant (appelé phase mobile, car il se déplace).

Quels sont les avantages de la chromatographie en phase liquide ?

2. Chromatographie en phase liquide sur microcolonnes Analogue à la chromatographie sur colonne en phase gazeuse. Avantages - économie de solvant; - produits utilisés en quantité réduite; - temps de séparation beaucoup plus courts.

Quels sont les différents types de chromatographie ?

?la chromatographie en phase gazeuse (CPG ou GC en anglais) également appelée CPV (chromatographie en phase vapeur) ; ?la chromatographie en phase liquide (CPL ou LC en anglais) ; Pr. MEGHABAR Rachid (rachidmeghabar@yahoo.fr; meghabarrachid@gmail.com) ?la chromatographie en phase liquide à haute performance (CLHP ou HPLC en anglais) ;

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HPLC

Autres désignations

Chromatographie en phase liquide haute

pression

Anglais

LHHHHH

HPLC

High Performance (or High Pressure) Liquid

Chromatography

Applications médicales

Utilisation principale

onyme anglo-saxon, le seul utilisé) a de multiples applications dans de nombreux domaines, seule son utilisation en biologie nous intéressera, elle permet : - en biochimie, .

- en hématologie, la reconnaissance et quantification des hémoglobines anormales, et le diagnostic de la

drépanocytose, des alpha et béta thalassémies de type hétérozygote ou monozygote. - en toxicologie, la mise en évidence et le dosage des substances - en pharmacologie, le dosage de nombreux médicaments pour un suivi efficace du traitement. - en hydrologie, dans le domaine de la potabilité des eaux dest dosage des principaux anions : (biochimie, hématologie, toxicologie,).

Principe de fonctionnement

colonne. Les constituants du mélange, étant inégalement retenus par la phase fixe de la colonne, se déplacent à des

vitesses différentes. Ils sont élués, en sortie de colonne, les uns après les autres et donc séparés. Un détecteur couplé

délivrant la phase mobile sous des pressions de 20 à 150 bars), silice de différentes granulométries, un détecteur (UV-visible, réfractométrie, fluorimétrie, ou spectrom

Version 09/2013 Page 2 sur 4

Pour plus de clarté, voir le schéma ci-dessous.

Options et versions disponibles sur le marché

Selon les applications , les versions disponibles sur le marché sont

très nombreuses, avec des choix de modules variés tels les pompes dont la pression délivrée varie de 20 à 150 bars,

les injecteurs manuels ou automatiques (la majorité), les fours à température variable, les détecteurs

dizaine de types). Il faut ajouter un outil informatique avec son logiciel.

000 Euros à plus de 200 000 Euros.

Cependant on trouve sur le marché de 000

Euros.

Structures adaptées

Ces appareils sophistiqués et onéreux doivent être réservés à des structures importantes : hôpitaux, CHU,

grosses cliniques.

Consommables et accessoires à prévoir

Désignation Fourchette de prix

Les solvants utilisés soit seuls soit en mélanges sont très différents selon la technique et nous citerons quelques exemples parmi un choix très vaste :

Les colonnes de chromatographie ont une

Méthanol : 25 Euros/l

Ethanol : 55 Euros/l

Cyclohexane : 50 Euros/l

DMSO : 100 Euros/l

Acétonitrile : 75 Euros/L

Colonnes de silice de 400 à 600 Euros/pièce

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durée de vie limitée. Elles peuvent être alors vidées, nettoyées et rechargés avec le support ad hoc prévoir, telles des connecteurs divers, des

Entretien

des résultats. impérativement les préconisations du constructeur.

Maintenance

Niveau de formation requis

jours. Encore faut-il avoir

de bonnes bases pour en profiter. Dans le cas contraire, il existe des formations approfondies, sur une dizaine de

interprétation des chromatogrammes.

Maintenance

Il faut suivre à la lettre le cahier de maintenance donné par le fournisseur, avec la maintenance journalière,

hebdomadaire, mensuelle, avec visite du fournisseur au moins annuellement. Il faut de plus savoir changer les

Utilisation

Niveau de formation requis

Le personnel utilisateur (biologiste, ingénieur, technicien de laboratoire) doit avoir suivi une forma

habilitée. cteur. Port de gants obligatoire pour la protection du personnel. Pièce climatisée, courant stabilisé et ondulé 220 V (ou 110) 50 Hertz.

Acheminement

Volume 3 à plusieurs m3

Poids entaine.

Précautions particulières Mise en caisse, de préférence par le fournisseur.

Personnes ressources

^= Personnes ressources :

Version 09/2013 Page 4 sur 4

André BAYLE, Biologie Sans Frontières : mca.bayle@orange.fr Louis BERNY, Biologie Sans Frontières : louis.berny@sfr.fr Roger LATER, Biologie Sans Frontières : r.later@wanadoo.fr

E-mail de B.S.F. courrier@bsf.asso.fr

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REMARQUES

Cette fiche n'est mise à disposition qu'à titre informatif et ne constitue en aucun cas un mode d'emploi. Pour

obtenir des renseignements supplémentaires sur un modèle précis de matériel, adressez-vous directement au

fabricant concerné. Vous pouvez également contacter les personnes ressources dont les coordonnées sont

indiquées en fin de fiche t de BSF et ne peut aucunement être considéré comme reflétant le point de vue -infos matériel développée et validée par le groupe de travail " le matériel médical dans les actions de coopération internationale

Humatem. Cette série est en accès libre sur les sites www.humatem.org et www.biologiesansfrontieres.org.

programme est cofinancé par:quotesdbs_dbs12.pdfusesText_18
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