[PDF] chromatographie liquide haute performance (hplc) - AC Nancy Metz
Dans les deux cas un fluide appelé phase mobile parcourt un tube appelé colonne Cette colonne peut contenir des "granulés" poreux (colonne remplie) ou être
[PDF] HPLC Principe et appareillage
20 jan 2010 · La chromatographie en phase liquide a permis de réaliser des analyses qui La phase mobile poussée par une pompe sous haute pression
[PDF] 4 CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE
de préférence « de haute performance » [HPLC] Ainsi jusqu'à ces années 1958-1960 la chromatographie en phase liquide sur colonne (CL)
[PDF] Chromatographie Liquide de Haute Performance (CLHP-HPLC) - Free
Liquide : travail en solution Haute performance : Grande efficacité de la séparation CPG : Chromatographie en Phase Gazeuse : ? composés volatils
[PDF] La Chromatographie en Phase Liquide CPL
une forte pression sur la phase mobile La CLHP Chromatographie Liquide à Haute Performance a donc été longtemps appelée Chromatographie Liquide sous
[PDF] Chromatographie en phase liquide haute pression HPLC High
Chromatographie en phase liquide haute pression Anglais LHHHHH HPLC High Performance (or High Pressure) Liquid Chromatography Applications médicales
[PDF] Mémoire LATIFA BEN SAAD
analytique la chromatographie liquide à haute performance à polarité de phase inversée (HPLC) L'objectif de cette étude est d'optimiser une méthode de
[PDF] COURS DE CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE
la phase stationnaire est soit un solide soit un liquide (fixé sur un support La chromatographie liquide haute performance est très utilisée dans tous
Dosage par chromatographie liquide haute performance de la
La séparation est réalisée sur colonne Xbridge® avec une phase acétate d'ammonium pH 4 / acétonitrile (10/90 v/v) en mode isocratique La détection est réalisée
[PDF] LA CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE
3) Influence du pH de la phase mobile la chromatographie en phase liquide de charge car travailler sous haute pression est toujours synonyme de
(PDF) Chromatographie Liquide à Haute Performance HPLC - ResearchG
CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE HAUTE PERFORMANCE (HPLC) I) Principe de la chromatographie La chromatographie est une méthode de séparation des constituants d'un mélange même très complexe Il existe trois principaux types de chromatographie: • la chromatographie en phase gazeuse (CPG) • la chromatographie en phase liquide à
Chromatographie en phase liquide à haute performance
La chromatographie en phase liquide à haute performance (CLHP) appelée plus fréquemment par l'abréviation anglaise HPLC ( high performance liquid chromatography ou plus rarement high pressure liquid chromatography ) (voir Figure 1 et 2 à la fin du cours) est une technique
CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE HAUTE PERFORMANCE (HPLC)
CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE HAUTE PERFORMANCE (HPLC) I) Principe de la chromatographie La chromatographie est une méthode de séparation des constituants d'un mélange même très complexe La chromatographie en phase liquide a permis de réaliser des analyses qui n'étaient
Searches related to chromatographie en phase liquide à haute performance pdf PDF
la chromatographie en phase liquide à haute performance (CLHP ou HPLC en anglais) ; la chromatographie en phase supercritique ou fluide supercritique (CPS ou SFC en anglais) On peut aussi les nommer selon les interactions développées par la phase stationnaire : la chromatographie chirale (qui est soit de la CPG soit de la CPL) ;
Qu'est-ce que la chromatographie liquide à haute performance ?
La chromatographie liquide à haute performance, souvent appelée du nom de son abréviation CLHP-HPLC en langue anglaise-constitue une technique analytique très générale d'emploi.
Quels sont les composants d’un système de chromatographie liquide haute performance ?
Les composants d’un système de chromatographie liquide haute performance (HPLC) de base sont représentés de manière simplifiée à la figure E. Un réservoir contient le solvant (appelé phase mobile, car il se déplace).
Quels sont les avantages de la chromatographie en phase liquide ?
2. Chromatographie en phase liquide sur microcolonnes Analogue à la chromatographie sur colonne en phase gazeuse. Avantages - économie de solvant; - produits utilisés en quantité réduite; - temps de séparation beaucoup plus courts.
Quels sont les différents types de chromatographie ?
?la chromatographie en phase gazeuse (CPG ou GC en anglais) également appelée CPV (chromatographie en phase vapeur) ; ?la chromatographie en phase liquide (CPL ou LC en anglais) ; Pr. MEGHABAR Rachid (rachidmeghabar@yahoo.fr; meghabarrachid@gmail.com) ?la chromatographie en phase liquide à haute performance (CLHP ou HPLC en anglais) ;
Mémoire
Mastère en chimie analytique
LATIFA BEN SAAD
ÉTUDE DE LA SÉPARATION DES FLUOROQUINOLONES PAR HPLC: APPLICATION À ÉTUDE DE LEUR DÉGRADATIONPAR RAYONNEMENT GAMMA
19 /12/2013 devant les membres du Jury:
Dédicace
-H GpGLH ŃH PUMYMLO j "A mes parents,
3RXU P·MYRLU VRXPHQXH PRXP MX ORQJ GH PHV pPXGHVB
3RXU P·MYRLU SHUPLVe G·rPUH TXL ÓH VXLVB
A PHV V±XUV
Pour tous les bons moments passés ensemble.
Pour avoir été toujours présentes à mes cotés TXMQG Ó·en avais besoin.A mes frères,
4X·LOV PURXYHQP GMQV ŃH PRGHVPH PUMYMLO OM SUHXYH GH PRQ MPRXU HP PM
gratitude éternelle. A mes amis et à PRXV ŃHX[ TXH Ó·MLPH HP TXL P·MLPHQP.Remerciements
Ce travail a été réalisé au Centre National des Sciences et Technologie Nucléaire
en Chimie Analytique à la Faculté des Sciences de Tunis. Je remercie infiniment Madame Faten BOUJELBANE-assistante au Centre National des Sciences et Technologies Nucléaires pour son encadrement, sa disponibilité ainsi Je remercie également Monsieur Fathi OUESLATI± recherche et des Technologies des eaux pour son aide et ses conseils. Mes vifs remerciements s'adressent à Monsieur Mohamed Taieb BEN DHIA de Conférences à la Faculté de Sciences de Tunis, qui a accepté de présider ce jury. Mes sincères remerciements s'adressent à Monsieur Mohamed SAMAALI leurs encouragements et leurs aides.Sommaire
Introduction générale ............................................................................................................... 1
Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques .... 2 ............................................................................... 31. Présentation générale des fluoroquinolones.................................................................... 3
2. Structure chimique des fluoroquinolones ....................................................................... 4
............................................................................... 4 ................................................. 5..................................................................................................... 5
ssification des quinolones ............................................................................................. 5
génération ................................................................................................... 6
.................................................................................................. 6génération................................................................................................... 6
quatrième génération ................................................................................................. 6
.......................................................................... 6 -chimiques de Lévofloxacine ............................................. 7 -chimiques de Loméfloxacine ............................................ 8 -chimiques de Ciprofloxacine ............................................ 9 ............................. 11 Chapitre II : La chromatographie liquide à hauteperformance HPLC ................................................................................................................ 13
........................................................................................................... 14
...................................................................................................................... 14
................................................................................. 14 .............................................. 15..................................................................................................... 15
.................................................................................................................. 16
................................................................................. 16b. La pompe ................................................................................................................... 17
La colonne ................................................................................................................. 17
............................................................................................................... 19
. 19 ............................................................................................ 225. Aperçu sur les paramètres chromatographiques de séparation ..................................... 24
Chapitre III .......... 28
....................................................................................................................... 29
...................................................................................... 29 ......................................................................................... 29-Préparation des solutions ........................................................................................... 30
......................................................................................... 31 .......................................................................... 37 ................................................................................... 39Chapitre IV ................. 42
................................................................................................................... 43
........................................................................................ 43 ........................................................................ 43 ............................................................................................... 43.................................................................................................. 44
............................................................................................. 44 ............................................................ 45 ................................................................................................. 45 ..................................................................... 47 .................................................. 48 -à-vis des rayonnements gamma ....................... 49........................................................................................................... 49
............................... 56 .............................................. 59Conclusion générale ............................................................................................................... 63
Références bibliographiques
Liste des figures
-développée de la Lévofloxacine...................................................... 7: Formule semi-développée de la Loméfloxacine ...................................................... 9
: Formule semi-développée de la Ciprofloxacine ..................................................... 10
: Spectre UV de la Ciprofloxacine ........................................................................ 31
nes enregistré dans les conditions opératoires : phase mobile : tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/ 20 v/v)à pH = 5 ; colonne Xterra RP-18 ........................................................................................... 33
: Chromatogramme du mélange des cinq fluoroquinolonnes enregistré dans les conditions opératoires : phase mobile : tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 v/v)à pH = 5 ; colonne PRISM RP-18 .......................................................................................... 33
....................... 35 : Variation des temps de rétention (tr) des fluoroquinolones par les deuxcolonnes : ............................................................................................................................... 36
-18 et PRISM RP-18 .............................................................................................. 36
ntion des fluoroquinolones en fonction du pH ......... 38 conditions opératoires : phase mobile : tampon phosphate (0,02 M) ±acétonitrile (80/20,v/v) à pH = 6 ; ........................................................................................................................ 39
-18 ............................................................................................................ 39
conditions opératoires ; phase mobile: tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20; v/v)à pH = 3; ................................................................................................................................ 39
-18............................................................................................................ 39
................................................ 40 ramme du mélange des cinq fluoroquinolones enregistre dans les conditions opératoires ; phase mobile: tampon phosphate (0,02M) ±à pH = 3; colonne Xterra RP-18 ............................................................................................ 41
....................................................................... 45 de la solution de Ciprofloxacine (100 ppm) avant irradiation (a) et après irradiation (b) : enregistrés avec; phase mobile : tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80 :20 v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 (250 mm x 4,6mm ; 5µm) .......... 50
: phase mobile : tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 (250mm x 4,6mm ; 5µm) .......... 51
mmes de la solution de Lévofloxacine (100 ppm) avant irradiation (a), après irradiation (b), enregistrés avec : phase mobile : tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18(250 mm x 4,6mm ; 5µm) .......... 52
(a), après irradiation (b), enregistrés avec; phase mobile : tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18(250 mm x 4,6mm ; 5µm) .......... 53
: tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18(250mm x 4,6mm ; 5µm) ........... 54
phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 ................. 55
; phase mobile :tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 .... 57
: Chromatogramme de la solution de dégradation de la Loméfloxacine (20ppm) avec une dose de 5kGy, enregistré dans les conditions opératoires suivantes ; phase mobile :tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 .... 57
avec une dose de 5kGy, enregistré dans les conditions opératoires suivantes ; phase mobile :tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 .... 57
les conditions opératoires suivantes ; phase mobile :tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 .... 58
avec une dose de 5kGy, enregistré dans les conditions opératoires suivantes ; phase mobile :tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 .... 58
fluoroquinolones (20ppm) avec une dose de 5kGy, enregistré dans les conditions opératoires ; phase mobile : tampon phosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ;colonne Xterra RP-18 ............................................................................................................ 59
; phase mobile : tamponphosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 ................. 60
e avec une dose de 25 kGy, enregistré dans les conditions opératoires suivantes ; phase mobile : tamponphosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 ................. 60
37: Chromatogramme de la solution de dégradation de Enrofloxacine avec une dose
de 25 kGy, enregistré dans les conditions opératoires suivantes ; phase mobile : tamponphosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 ................. 60
: Chromatogramme de la solution de dégradation de Loméfloxacine avec une dose de 25 kGy, enregistré dans les conditions opératoires suivantes ; phase mobile : tamponphosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 ................. 61
de 25 kGy, enregistré dans les conditions opératoires suivantes ; phase mobile : tamponphosphate (0,02M) ±acétonitrile (80/20 ; v/v) à pH = 3 ; colonne Xterra RP-18 ................. 61
Liste des tableaux
: Propriétés physico-chimiques de la Lévofloxacine ................................................. 7
: Propriétés physico-chimiques de la Loméfloxacine ................................................. 9
: Propriétés physico-chimiques de la Ciprofloxacine .............................................. 10
Préparation des solutions standards ........................................................................ 30
-chimiques des colonnes utilisées ............................. 32sur les deux colonnes HPLC .................................................................................................... 34
.. 40 : Les temps de rétention (t ....................................... 56Introduction générale
1Introduction générale
Les médicaments sont des substances chimiques ou naturelles, utilisés pour le traitement ou la prévention des maladies. Chaque médicament renferme des principes actifs fluoroquinolones, sujet de cette étude sont des médicaments appartenant au groupe des antibiotiques et ils sont prescrits généralement pour le traitement des infections urinaires. Pour étudier la dégradation de ces principes actifs, on choisit comme techniqueanalytique la chromatographie liquide à haute performance à polarité de phase inversée
solutions de dégradation de ces principes actifs après leur irradiation par le rayonnement gamma. Le premier chapitre est consacré à la présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques. Dans le second chapitre, on présente la technique de chromatographie liquide à haute performance et des paramètres de séparation. Dans le troisième chapitre, une méthode analytique permettant la séparation et Enfin concernant le dernier chapitre, la méthode ainsi optimisée sera appliquée pour analyser les solutions de dégradation des fluoroquinolones après exposition aux rayonnements gamma.Chapitre I
Présentation des fluoroquinolones et de
leurs propriétés physico-chimiques Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques 3I. Les antibiotiques en médecine humaine
Ils Ils ont pour objectifs la maîtrise des maladies et la prévention de la transmission des agents pathogènes aux autres; citons comme exemple les sulfamides, les fluoroquinolones[1].1. Présentation générale des fluoroquinolones
Les quinolones qui comportent un atome de fluor sont appelées les fluoroquinolones antibiotiques qui forment une large classe d'antibactérien et sont obtenus par synthèse chimique à partir de la chloroquine. Le premier composé de ce groupe est l'acide nalidixiquequi a été décrit pour la première fois en 1962. Cependant, les premières quinolones
développées ont eu une application clinique limitée et sont utilisées pour traiter les infections
urinaires seulement [2] dans les tissus. Ils permettent donc de traiter de nombreuses infections génitales, urinaires,gastro-intestinales et osto-articulaires. Les fluoroquinolones sont des antibiotiques à large
spectre bactérien et devenues très utilisées en médecine humaine et vétérinaire par rapport aux
autres antibiotiques 3 Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques 42. Structure chimique des fluoroquinolones
chimique des fluoroquinolones comporte une fonction cétone (C=O) et une fonction acide (COOH), qui ont une grande tendance à piéger les ions divalents comme les ions Ca FeMg" Les fluoroquinolones sont des molécules obtenues par synthèse chimique qui dérivent un carboxylate en position 3, un carbonyle en position 4 et un atome de fluor en position 6. groupe R est généralement un groupe pipérazine dérivant de la quinoléine [3.3. Mode d'action des fluoroquinolones
bactérien. Elles bloquent la synthèse de l'ADN topo-isomérase II et IV [3] Lorsqu'elles sont diffusées dans le cytoplasme, les fluoroquinolones vont inhiber demanière sélective la réplication de l'ADN bactérien. Les fluoroquinolones ciblent deux
enzymes parentes appartenant à la famille des topo-isomérases II et qui sont impliquées dans
chez les bactéries à Gram négatif. La topo-isomérase IV est une cible principale chez les
bactéries à Gram positif. Les nouvelles fluoroquinolones sont la Gatifloxacine et laMoxifloxacine
Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques 5 des fluoroquinolones administrées par voie orale ou administrées par voie intraveineuse peut fournir des avantages significatifs en termes de réduction del'hospitalisation ou des frais de soins à domicile. L'utilisation de ces antibiotiques est très
efficace et très recommandée.4. Les propriétés pharmacologiques des fluoroquinolones
ble,Marbofloxacine. Elles pénètrent bien dans les tissus et leur volume de distribution est
par les voies rénales. Pour la plupart de ces substances, le métabolisme compte moins de 20%5. Les effets indésirables
fluoroquinolones sont bien tolérées, mais leurs effets secondaires ne traitement et de la qualité du médicament administré. Ces effets secondaires nécessitent rarement un arrêt du traitement. La plupart de ces effets sont des troubles osto-articulaires, cutanés, digestifs et neurologiques, toutefois leur incidence peut varier suivant les composés [4.II. Classification des quinolones
fluoroquinolones prend en compte le spectre antimicrobien etleurs indications cliniques. Cette classification est un outil pour les médecins à utiliser lors de
la prescription de ces médicaments ou l'évaluation de nouveaux principes actifs introduits dans le marché. Un médicament de chaque groupe est similaire à une activité antimicrobienne. Avec chaque génération successive, un nouveau groupe important d'agentspathogènes est ajouté à la couverture. Les quinolones sont habituellement classées en quatre
Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques 61. La première génération
n ont un spectre étroit et limité contre les bactéries et aussi contre les germes de type Gram négatif.2. La deuxième génération
es fluoroquinolones de la deuxième génération sont les: Ciprofloxacine, Norfloxacine, Enoxacine, Loméfloxacine, Ofloxacine et Péfloxacine.3. La troisième génération
génération contient les composés suivants : La Grépafloxacine, laSparfloxacine, la Témafloxacine et la Lévofloxacine. Les agents de cette génération ont une
activité accrue contre les bactéries et contre les pathogènes atypiques.4. La quatrième génération
a les mêmes propriétés que les agents de la troisième génération mais avec unecouverture anaérobique beaucoup large. Les substances de la quatrième génération sont: la
Trovafloxacine, la Moxifloxacine, la Gémifloxacne, la Sitafloxacine, la Clinafloxacine et laGatifloxacine.
III. Présentation des principes actifs utilisés se lancer dans la manipulation proprement dite, il est nécessaire de connaitredes informations sur le mélange à analyser (nature et mode de préparation) et aussi les
propriétés physiques et chimiques des composés à séparer (polarité, solubilité et pH). Les
Ciprofloxacine, la Lomefloxacine et la Moxifloxacine. Ces produits sont généralement Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques 71. Les caractéristiques physico-chimiques de Lévofloxacine
Lévofloxacine est un antibiotique de la famille des fluoroquinolones, commercialisé en Europe par le laboratoire Sanofi-Aventis sous le nom Tavanic®. Lévofloxacine estaussi un bactéricide très efficace sur les bactéries gram-positives et gram-négatives.
action est d'empêcher la réplication bactérienne en bloquant les enzymes ADN gy-rases nécessaires à l'ouverture de la double hélice d'ADN bactérienne, utilisé généralement
pour le traitement des infections pulmonaires. Ce composé est stéréo-chimiquement stable -chimiques sont regroupés dans le tableau 1 [6. Figure 3 : -développée de la LévofloxacineTableau 1: -chimiques de la Lévofloxacine
1-yl)-1,4-dihydroquinoleine-3-carboxylique monohydraté
Formule brute C18H20FN3O4
Masse molaire
(g/mol)361,36
Point de fusion (°C)
255-257
pka 6,1 - 8,7Description
Poudre de coloration jaune claire
Médicament TAVINIC
Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques 82. Les caractéristiques physico-
noxacine est commercialisée en France sous le nom d'Enoxor ; ce principe actif est physico-chimiques sont regroupées dans le tableau 2 [7]161833
3. Les caractéristiques physico-chimiques de Loméfloxacine
oméfloxacine est un antibiotique de synthèse fortement bactéricide de la famille des fluoroquinolones. Elle est active sur un grand nombre de germe de type gram positifs et gramnégatifs. La Loméfloxacine est administrée seulement par voie orale. Ces propriétés physico-
chimiques sont regroupées dans le tableau 3 [8] Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques 9Figure 5 -développée de la Loméfloxacine
Tableau 3: ropriétés physico-chimiques de la Loméfloxacine4.Les caractéristiques physico-chimiques de laCiprofloxacine
La Ciprofloxacine est un antibiotique de synthèse créé et commercialisé par le laboratoire Bayer sous le nom de Ciflox®. Elle appartient à la famille de la deuxièmegénération des fluoroquinolones. Elle neutralise la réplication des enzymes bactériennes et
empêche toutes les multiplications cellulaires. Elle agit sur les ADN gy-rases etparticulièrement sur la topo-isomérase IV. Ces propriétés physico-chimiques sont regroupées
dans le tableau 4 [9 Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques 10Figure 6: -développée de la Ciprofloxacine
Tableau 4 : -chimiques de la Ciprofloxacine
5.Les caractéristiques physico-
Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques 11 II. Les principaux travaux antérieurs effectués sur les fluoroquinolones centre La plupart des analyses des fluoroquinolones sont effectuées par la chaine HPLC à polarité de phase inversée en utilisant une colonne de type Zorbax Bonus RP-14(5µm, 125mm×4mm). La détection de ces fluoroquinolones a été réalisée à la fois par un
détecteur à barrette de diode '$'DYHF 277 nm) et par un spectrométre de masse. Les Chapitre I : Présentation des fluoroquinolones et leurs propriétés physico-chimiques 12 Par ailleurs, le dosage de 15 fluoroquinolones, se trouvant dans une matrice urinaire humaine a été effectué par HPLC, en utilisant une colonne de type C18- RP et une phase(20%) avec un débit de 1,5 mL/min. La détection des fluoroquinolones a été effectuée par un
et 0,8 ppm respectivement. La méthode a été validée et appliquée avec succès pour analyser
les médicaments à usage humain et vétérinaire [11. La Lévofloxacine et la Moxifloxacine ont été déterminées dans le plasma et dans le liquide amniotique par la chromatographie liquide à haute performance ( HPLC) en phaseinversée. Cette étude a été décrite dans la littérature, en utilisant une colonne Cune phase
La détermination des traces de résidus des antibiotiques de la famille des eaux de surface du fleuve Mondego a été effectuée par la chromatographie liquide à haute performance. On utilise une colonne de type Chromolith RP-C de dimension (100 mm x 6,4 mm) avec une détection par fluorescence aux longueurs d'onde d'excitation et d'émission de278 et 450 nm respectivement 13.
Chapitre II
La PHŃOQLTXH G·MQMO\VH XPLOLVpH : la
chromatographie liquide à haute performance HPLC Chapitre II : : La chromatographie liquide à haute performance HPLC 14I. La chromatographie
1. Historique
méthode est introduite en pratique dans les laboratoires par Kuhn et Elederer à Heidelberg en Allemagne. En quelques années, la chromatographie en phase liquide sur colonne devient une technique rendant possible de nombreuses découvertes concernant différentes disciplines. En 1938, Reichstein introduit la chromatographie liquide pour séparer des substances incolores. Avant les années 1970, un petit nombre de méthode chromatographique est utilisé dans les composées chimiques complexes [14].2. Définition de la chromatographie
chromatographie est un ensemble de procédés applicables à des mélangesmoléculaires ou ioniques, basés sur des différences de distribution des solutés entre une phase
stationnaire et une phase mobile continue: les deux phases étant mises en contact intime et à contre courant. ¾ Les différentes méthodes chromatographiques Les différentes méthodes chromatographiques sont :9 hromatographie en phase gazeuse CPG
9 hromatographie sur couche mince CCM
9 hromatographie en phase liquide CPL
9 hromatographie liquide à haute performance HPLC
9 hromatographie en phase supercritique CPS
Chapitre II : : La chromatographie liquide à haute performance HPLC 15 II. La chromatographie liquide à haute performance (HPLC)1. Principe de la HPLC
dans la phase mobile liquide (éluant). Grâce à la répartition sélective des solutés entre la
phase mobile et la phase stationnaire, chaque soluté est donc soumis à une force de rétention
exercée par la phase stationnaire, et une force de mobilité due à la phase mobile. Suivant la
nature des molécules, elles interagissent plus ou moins avec la phase stationnaire dans un tube appelé colonne chromatographique. La phase mobile, poussée par une pompe sous forte pression, parcourt le systèmechromatographique. Le mélange à analyser est injecté puis transporté à travers le système
chromatographique. Les composés en solution se répartissent alors suivant leur affinité entre
la phase mobile et la phase stationnaire. En sortie de colonne, grâce à un détecteur approprié,
chromatogramme 15. Chapitre II : : La chromatographie liquide à haute performance HPLC 162. Appareillage
(figure 9). Tous les organes du système sont liés à un micro-ordinateur qui pilote tous les processus. signaux). a. Le réservoir de la phase mobile 16.quotesdbs_dbs6.pdfusesText_11[PDF] narration visuelle histoire de l art
[PDF] affirmation et mise en oeuvre du projet européen depuis 1945
[PDF] affirmation et mise en oeuvre du projet européen 3e
[PDF] affirmation et mise en oeuvre du projet européen eduscol
[PDF] affirmation et mise en oeuvre du projet européen 3ème
[PDF] biographie de claude gueux
[PDF] claude gueux fiche de lecture
[PDF] claude gueux texte intégral
[PDF] claude gueux victor hugo questionnaire reponse
[PDF] exercice loi binomiale 1ere s
[PDF] guilhem en week end dans une station de ski se trouve tout en haut de la station
[PDF] une station de ski a relevé le nombre de forfaits
[PDF] une association cycliste organise une journée de randonnée ? vélo
[PDF] david diop coups de pilon afrique mon afrique