moitié de la vitesse maximale L’affinité d’une enzyme pour un substrat est égale à 1/Km : Km est élevée l’affinité est faible Km est faible l’affinité est élevée 2 5 Représentation de Lineweaver et Burk On peut écrire l’équation de Michaelis et Menten de la manière suivante :
Exercice 02 : La représentation de la cinétique d’une réaction enzymatique selon l’expression de Lineweaver et Burk, permet de montrer que la droite croise l’axe des ordonnées à 0, 037 ; tandis que la pente de cette droite est de 1, 04 x 10 -3 Quelle est la
La représentation de Lineweaver-burk 1 / V = 1 / [S] 3 (les 3 types d’inhibition) Figure 9 : Différentes méthodes d'immobilisation des enzymes Figure 10 :
correspond à la vitesse maximale de la réaction enzymatique => Ce qui donne l'équation de Michaelis-Menten : V 0=V max • I S I K m+ISI La représentation « Lineweaver-Burk plot »obtenue à partir de l'inverse de l'équation précédente correspond à une linéarisation de la relation entre K m et V max 1 =1/ ( V max • I S I ) = K
A la fin de la réaction la structure de l’enzyme se retrouve inchangée Lineweaver et Burk Représentation en double inverse : 1/V = f ( 1/S )
Discuter de la précision de la méthode 3 En utilisant le tableur, calculer 1/Vi et 1/[S], et présenter graphiquement les résultats obtenus selon la représentation de Lineweaver-Burk 4 A l’aide des fonctionnalités du tableur, tracer la droite de régression et déterminer son équation pour estimer le Km et le Vmax de l’enzyme
KM) et par la représentation de Lineweaver-Burk : -En présence d’inhibiteur compétitif : Vmax est constante, K M augmente -En présence d’inhibiteur non compétitif absolu : Vmax diminue, K M reste constante -En présence d’inhibiteur incompétitif : Vmax diminue, K M diminue
La valeur de la densité optique pour les temps 450 et 600 est constante, cela signifie que la Traçons la représentation de Lineweaver-Burk 1 v =f 1
2) Courbe de Michaelis a) Tracez la représentation de la vitesse initiale en fonction de la concentration de S Commentez cette courbe b) Déterminez les paramètres cinétiques 3) Tracé de Lineweaver-Burk a) Déterminez à partir de cette représentation les paramètres cinétiques
Document 1: Etude de la vitesse initiale de la LDH pour diverses valeurs de concentration initiale en pyruvate 1 Tracez le graphe de la vi en fonction de [S]0, et commentez l’allure obtenue 2 Tracez la courbe de cinétique dans la représentation de Lineweaver-Burk En faisant les choix que vous jugerez nécessaires : a
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Chapitre 5 : Les enzymes
2 5 Représentation de Lineweaver et Burk On peut écrire l’équation de Michaelis et Menten de la manière suivante : V = ou 1 / V = 1 / V =( x ) + Equation de type : Y = a X + bTaille du fichier : 979KB
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Enzymologie - Faculté de Médecine et des Sciences de la
Représentation de Lineweaver et Burk (en double inverse) 1/V 1/[S] K m /Vmax 2/Vmax -1/K 1/K m m 1/Vmax droite de la forme y = ax + b, avec a = K m /Vmax et b = 1/Vmax Vmax K m V 1 = 1 Vmax + 1 [S]
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TD09 : la cinétique enzymatique et le type d’inhibition
Exercice 02 : La représentation de la cinétique d’une réaction enzymatique selon l’expression de Lineweaver et Burk, permet de montrer que la droite croise l’axe des ordonnées à 0, 037 ; tandis que la pente de cette droite est de 1, 04 x 10-3 Quelle est la constante de Michaelis (Km) de cette enzyme ?
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4 Effet de la concentration d’enzyme
1 Méthode de Lineweaver-Burk Le réciproque de l’équation de Michaelis-Menten est très utile pour l’analyse des données de cinétique: qu'on peut aussi écrire et qui se simplifie en L'avantage de cette transformation mathématique est qu'elle permet de tracer un graphique 1/V o vs 1/[S] dont la courbe est en fait une droite pourTaille du fichier : 351KB
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tdr47 ————— LemodèledeMichaelis-Menten
plot(x, y, pch = 19, main = "Transformation de Lineweaver & Burk", las = 1, xlab = expression(1/s), ylab = expression(1/v)) lm1
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Réponses : cinétique enzymatique
Traçons la représentation de Lineweaver-Burk 1 v =f 1 [S]0 (on note [S] à la place de [S]0) 1 /[ATP] M-1 13,3 104 8 104 4,9 104 3 104 1,6 104 1/v (s/M) 14,9 106 10,5 106 8,3 106 6,6 106 5,4 106 Régression Excel y = 80,492x + 4E+06 R2 = 0,9994 0,0E+00 2,0E+06 4,0E+06 6,0E+06 8,0E+06 1,0E+07 1,2E+07 1,4E+07 1,6E+07 0,0E+00 4,0E+04 8,0E+04 1,2E+05 1,6E+05
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Enzymologie - Université de Tours
Km grâce à différents traitements mathématiques, parmi lesquels la représentation en double inverse 1/V 1/[S] 1/Vm -1/Km [ ] [[ ] [ ] 1 [ ] [ ] [ ] max max max max V K V S S V S S K S K V V S V m m m = + + ⇔ = + = max max 1 [ ] 1 1 V V K V S = m + 1 Lineweaver et Burk Représentation en double inverse : 1/V = f ( 1/S ) Le problème principal de cette méthode estTaille du fichier : 139KB
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Devoir n°5 – Eléments de correction
– présenter la représentation de Lineweaver-Burk – Ce modèle correspond à l'observation pour certains types de cinétique, dits michaéliens – Ce modèle n'explique en revanche pas certaines cinétiques plus complexes, dites allostériques – Notion de site actif, de complexe enzyme substrat 4 Ligands et modifications covalentes peuvent changer la conformation d'une protéine
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Extraction et Eude cinétique de l’invertase
d’utiliser la représentation dite « des doubles inverses » représentation de Lineweaver-Burk D’autres courbes peuvent être tracées dont celles de Eadie-Hofstee et Hanes-Woolf (voir figure ci-dessous) 5
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UNIVERSITE AIX-MARSEILLE Licences Sciences et technologies
D’où l’équation de Lineweaver–Burk On trace donc la représentation graphique en double inverse 1/vi=f(1/[S] 0) pour déterminer Vmax et Km DO à 280 nm N° des fractions Vo= volume mort Pic 1 contient la protéine à 66 kDa Pic 2 25 kDa
(représentation V en fonction de S selon Michaélis-Menton) ▫ Représentation en double inverse ▫ Représentation Selon lineweaver Burk 1/V en fonction
AGB S M . Enzymologie CRS Bouslamti
l'équation de Michaelis-Menten : V0=Vmax • I S I Km+ISI La représentation « Lineweaver-Burk plot »obtenue à partir de l'inverse de l'équation précédente
cinetique aguper
❖ L'équation de Michaelis-Menten décrit la courbe cinétique de Vo-[S]: - Pour des concentrations faibles de substrat, lorsque [S]
cinetique enzyme
Ajustement par régression non-linéaire du modèle de Michaelis-Menten La transformation de Lineweaver et Burk [9] consiste à représenter y = 1 v en fonction
tdr
Il s'agit de la représentation la plus utilisée par les enzymologistes même s'il vaudrait mieux utiliser d'autres représentations plus adaptées Lineweaver - Burk
CM M enzymes
Représentation de Eisenthal et Cornish-Bowden (graphe linéaire direct) Les représentations de Lineweaver-Burk et Eadie-Hofstee ont une coordonnée en
cinetique
Equation de Michaelis - Menten (1913) Dans la suite du cours, sauf Km grâce à différents traitements mathématiques, parmi lesquels la représentation
Enzymologie thorique Bio M
f représentation graphique de Lineweaver et Burk On peut écrire l'équation de Michaelis-Menten selon l'équation de Lineweaver et Burk (figure suivante)
Biochimie m C A tabolique IA FBS Enzymologie
19 jui 2002 · Hyperbole de Michaelis-Menten 56 Diagramme de Lineweaver et Burk de la concentration du substrat, en représentation normale ou en
eebioch
(représentation V en fonction de S selon Michaélis-Menton). ? Représentation en double inverse. ? Représentation de Eadie- Selon lineweaver Burk.
? Pour déterminer les valeurs de la vitesse maximale (Vm) et la constante de Michaelis (Km) on réalise la représentation graphique de Lineweaver-Burk : 1/Vi =
Représentation de Eisenthal et Cornish-Bowden (graphe linéaire direct) . Les représentations de Lineweaver-Burk et Eadie-Hofstee ont une coordonnée en ...
Aide 1 : La représentation de Michaelis-Menten n'est pas appropriée. Aide 2 : La représentation de Lineweaver et Burk est une droite (qui peut être ...
résultats expérimentaux relatifs aux deux enzymes sont analysés à l'aide des représentations graphiques de Lineweaver-Burk 1/v = f(1/(S)) comme il est
-La détermination de la valeur de la constante de Michaelis(Km) est donc immédiate lorsque la droite de Lineweaver-Burk est tracée. -pour cette présentation
Traçons la représentation de Lineweaver-Burk Le graphe de Lineweaver-Burk n'est pas une droite le mécanisme de l'enzyme n'est pas un.
Lineweaver et Burk. Représentation en double inverse : 1/V = f ( 1/S ). Le problème principal de cette méthode est la prépondérance accordée aux valeurs les.
On fait les mêmes manipulations et on construit la représentation de Lineweaver-Burk de la cinétique avec inhibiteur. vmax n'est pas modifié.
3. Signification de Vmax et Km (Voir cours). 4. Calcul de Vmax et Km. Représentation en coordonnées inverses de Lineweaver et BurK. 1/S mol-1.L.
ENZYMOLOGIE