Mesure de l’activité enzymatique
Mesure de l’activité enzymatique • L’activité d’une enzyme se mesure: 1 Soit par la vitesse de disparition d’un substrat 2 Soit par la vitesse d’apparition d’un produit 3 Soit par la vitesse d’utilisation d’un cofacteur 4
Chapitre 3 Les enzymesLes enzymes - jcgozlancom
intermédiaire obligatoire de la réaction enzymatique-accord avec le concept de reconnaissance enzymeaccord avec le concept de reconnaissance enzyme - substrat du type"clé - serrure« proposé par Emil Fisher en 1894 -Henri fût donc le premier à décrire l'équation mathématique reliant l'effet de la concentration du substrat à la vitesse de
La Cinétique enzymatique À Un substrat
réaction enzymatique Différentes phases Pré-stationnaire Stationnaire Post stationnaire Caractéri-stiques Enzyme mise en présence d’excésde substrat Combinaison ES très rapide Enzyme saturée par le substrat Combinaison ES està concentration maximale Constante Vitesse de la réaction est constante: Vitesse initiale (Reste constante
BIOCHIMIE GÉNÉRALE - Dunod
II Vitesse initiale de la réaction du premier ordre 85 III Application de ces principes à la réaction enzymatique 85 1 Les deux étapes 85 2 Vitesse initiale 86 3 Représentations graphiques 88 IV Influence de différents paramètres sur la vitesse initiale 89 1 Influence de la température 89 2 Influence du pH 90 V Différents
1 SP T1C6 enzymes cours - lewebpedagogiquecom
2 Mode d’action des enzymes 2 1 Les caractéristiques de la cinétique enzymatique On appelle cinétique enzymatique, l’étude de la vitesse des réactions enzymatiques L’activité d’une enzyme est déterminée par la vitesse à laquelle elle catalyse une réaction chimique
1 SP act C6 2 enzymes 2 corrigé - lewebpedagogiquecom
La vitesse initiale d’une réaction enzymatique fournit une mesure de l’activité d’une enzyme (voir document 1) Le modèle de l’action enzymatique présenté dans le document 1 suppose qu’une interaction physique entre l’enzyme et son substrat est nécessaire pour que l’enzyme catalyse la réaction On cherchait à valider ce
Chapitre 1 : Le rôle des enzymes dans le métabolisme glucidique
Action enzymatique sur les macromolécules de glucides Variation de la vitesse de réaction en fonction du pH-5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0 2 4 6 8 10 12 pH
ENZYMES GLUCIDES ET CATALYSE ENZYMATIQUE
ENZYMES, GLUCIDES ET CATALYSE ENZYMATIQUE Document 1 : les enzymes, des catalyseurs biologiques Longtemps, les sientifiques ont été surpris par la vitesse élevée des réations iologiques alors qu’elles ont lieu à asse température (37°C)
CHAPITRE 1 : Le rôle des enzymes dans le métabolisme glucidique
On définit pour chaque enzyme une température et un pH optimaux, où l’activité enzymatique est maximale, la vitesse de réaction maximale Variation de la vitesse de réaction en fonction du pH-5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0 2 4 6 8 10 12 pH A Série1
[PDF] cinétique enzymatique ? deux substrats
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enzymatique
DR AKSAS
1Il
2Cette mesure consiste à évaluer la
3L'actiǀitĠ d'une enzyme se mesure
1.d'un
d'apparition d'un3.d'utilisation d'un
4Méthodes de mesure
2 Méthode en point final ou " à deux points »Méthodes cinétiques:
1. 5 Si expérimentales[S]0 et[S]0 la d'enzyme C'est doser d'enzyme 6Conditions opératoires
et maximale a)0et déterminer contient. b) optimale c) [S]( activateurs 7Le substrat
Le Pour Pour Il doitMais Un de on exige que S > 10 Km. 8Température
En , CSFBC(société
C 9La durée de la mesure
AE = Vi en [ ] saturante de substrat
10 10Le Témoin
Dans les méthodes " 2 points »
On Ce que .Dans les méthodes cinétiques
On 11Les unités enzymatiques
katalquantité seconde trop-Launité
internationalequi catalyse minute 6012
Les unités enzymatiques
Nombre
AEMNombre
ASElle enzymatique
13Les unités enzymatiques
Le=
/ Activité enzymatique totale de départ (x Le=
spécifique de départ 14 1 manuelle 1. durée, 2.son 3.Į .15
Méthode en point final ou à " 2 points »
Ladoit
Le lorsque nécessaire¾soit
¾soit
zone0en¾soit.
16Méthode en point final ou à " 2 points »
Faire Ce (Exemple transformer 17Méthode en point final ou à " 2 points »
Exemple:
LetĮ-;
-30. -Dinitro 18 ALATMéthode en point final ou à " 2 points »
C solution 19 2Consiste de
La spécifiqueUV visible
tempsplus 20Cinétique enzymatique en Ultra
LeNAD/NADH NADP/NADPH
employé LaUV NAD+/NADHqui
sont Ces Cette 21Méthodes cinétiques
Dans continu, fixée La réactif) stabilise EllePpermet
22Cinétique enzymatique en Ultra
NAD considérés(réactionAH2 + NAD+ A + NADH,H
AH2 + NADP+ A + NADPH,H
[NAD+ ] > 10 NAD 23Cinétique enzymatique en
NADH NAD+, Si réduction NAD+,la; oxydation deDO. LeNADPHİ -cm- 24
Cinétique enzymatique en
NADH-cm-
NAD+ 25AEMesure
de 340nmAE diminution
de A340nm LDH NADн et NADH2 prĠsentent un pic d'absorbtion ( surtout NAD+) a 260 nm alors on mesure électivement Le NADH2 a 26A 340 nm ( UV) Si on mesure :
27Cinétique enzymatique en Ultra Violet
Condition cte
permet Dans tampon àNADH,H .
Puispyruvate
On La droite 28Lactate déshydrogénase
(EC 1.1.1.27)Lactate = substrat
Pyruvate = produit
NAD+/NADH = cofacteur
29Cinétique enzymatique en
OnDO/min
déclenchée, Les OnT E 3 UI.l-
VTet VE en3
30Cinétique enzymatique en
DO = İ
DO1 İ 1 1=1 İ
DO2 İ 2 2=2 İ
2-1=DO2 İ DO1 İ
0 31Cinétique enzymatique en
= x x 6A 340 nm İNADH,H + = -. cm-.l.
AE en 32VE VT
Réactions enzymatiques couplées
déshydrogénase à NAD+ ou NADP+ et que ni S et ni P ne possèdent de propriétés spectrales, alors on couple la première R à une deuxième, catalysée par une déshydrogénase dont P est le substrat. S P PH2 33E1
NADH,H NAD+
Réactions enzymatiques couplées
La 1ere R principale
La 2eme R indicatrice
34Réactions enzymatiques couplées
Exemple
Acɲ-
AOANADH,H Malate NAD+
35ASAT