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Mesure de l’activité enzymatique

Mesure de l’activité enzymatique • L’activité d’une enzyme se mesure: 1 Soit par la vitesse de disparition d’un substrat 2 Soit par la vitesse d’apparition d’un produit 3 Soit par la vitesse d’utilisation d’un cofacteur 4



Chapitre 3 Les enzymesLes enzymes - jcgozlancom

intermédiaire obligatoire de la réaction enzymatique-accord avec le concept de reconnaissance enzymeaccord avec le concept de reconnaissance enzyme - substrat du type"clé - serrure« proposé par Emil Fisher en 1894 -Henri fût donc le premier à décrire l'équation mathématique reliant l'effet de la concentration du substrat à la vitesse de



La Cinétique enzymatique À Un substrat

réaction enzymatique Différentes phases Pré-stationnaire Stationnaire Post stationnaire Caractéri-stiques Enzyme mise en présence d’excésde substrat Combinaison ES très rapide Enzyme saturée par le substrat Combinaison ES està concentration maximale Constante Vitesse de la réaction est constante: Vitesse initiale (Reste constante



BIOCHIMIE GÉNÉRALE - Dunod

II Vitesse initiale de la réaction du premier ordre 85 III Application de ces principes à la réaction enzymatique 85 1 Les deux étapes 85 2 Vitesse initiale 86 3 Représentations graphiques 88 IV Influence de différents paramètres sur la vitesse initiale 89 1 Influence de la température 89 2 Influence du pH 90 V Différents



1 SP T1C6 enzymes cours - lewebpedagogiquecom

2 Mode d’action des enzymes 2 1 Les caractéristiques de la cinétique enzymatique On appelle cinétique enzymatique, l’étude de la vitesse des réactions enzymatiques L’activité d’une enzyme est déterminée par la vitesse à laquelle elle catalyse une réaction chimique



1 SP act C6 2 enzymes 2 corrigé - lewebpedagogiquecom

La vitesse initiale d’une réaction enzymatique fournit une mesure de l’activité d’une enzyme (voir document 1) Le modèle de l’action enzymatique présenté dans le document 1 suppose qu’une interaction physique entre l’enzyme et son substrat est nécessaire pour que l’enzyme catalyse la réaction On cherchait à valider ce



Chapitre 1 : Le rôle des enzymes dans le métabolisme glucidique

Action enzymatique sur les macromolécules de glucides Variation de la vitesse de réaction en fonction du pH-5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0 2 4 6 8 10 12 pH



ENZYMES GLUCIDES ET CATALYSE ENZYMATIQUE

ENZYMES, GLUCIDES ET CATALYSE ENZYMATIQUE Document 1 : les enzymes, des catalyseurs biologiques Longtemps, les sientifiques ont été surpris par la vitesse élevée des réations iologiques alors qu’elles ont lieu à asse température (37°C)



CHAPITRE 1 : Le rôle des enzymes dans le métabolisme glucidique

On définit pour chaque enzyme une température et un pH optimaux, où l’activité enzymatique est maximale, la vitesse de réaction maximale Variation de la vitesse de réaction en fonction du pH-5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0 2 4 6 8 10 12 pH A Série1

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1 SP T1 - cours génétique. T. Leclerc

1 Chapitre 6 - Les enzymes, protéines de fonction issues du patrimoine génétique En exprimant certains gènes, une cellule produit des protéines qui modifient son phénotype

cellulaire. Certaines protéines jouent un rôle de matériau de construction (protéines de

structure), d'autres interviennent dans les réactions chimiques de la cellule (protéines de fonction). Nous allons étudier le cas des enzymes, protéines de fonction qui jouent un rôle essentiel dans la vie cellulaire et la spécialisation des cellules.

1. Rôle essentiel des enzymes dans la vie cellulaire

1.1 Les enzymes sont des catalyseurs biologiques

Les enzymes sont des biomolécules qui accélèrent les réactions biochimiques. • En tant que protéines, ce sont des biomolécules ou molécules du vivant.

• Elles accélèrent une réaction chimique qui est normalement possible mais très lente et

elles restent inchangées à la fin de la réaction : ce sont des catalyseurs. • Elles agissent à très faible concentration, chaque enzyme pouvant catalyser un grand nombre de réactions (de l'ordre de 100 000 réactions par seconde)

Cycle catalytique simplifié page 132 Nathan

Les enzymes agissent dans des conditions compatibles avec la vie et sont ainsi qualifiées de catalyseurs biologiques ou biocatalyseurs. En effet, chaque enzyme n'agit que dans des gammes de température et de pH précises. Une enzyme a une activité maximale pour une valeur donnée de la température, c'est la température optimale (celle de l'organisme ou du milieu dans lequel il vit) et pour une valeur donnée de pH, c'est le pH optimal (celui du site de l'organisme où l'enzyme agit).

1.2 La double spécificité des enzymes

Les enzymes ont une double spécificité :

- une spécificité de substrat : elles n'agissent et ne transforment qu'un seul type de molécule;

- une spécificité d'action : elles catalysent un seul type de réaction chimique.

La double spécificité des enzymes oriente le métabolisme cellulaire (ensemble des réactions

biochimiques se déroulant dans une cellule). En effet, l'équipement enzymatique d'une cellule définit les devenirs possibles de toute molécule présente dans la cellule. Le bon f onctionnem ent d'une enzyme est fondamental pour le déroulement correct des diverses réactions métaboliques d'une cellule. Les enzymes sont ainsi essentielles à la vie cellulaire. Elles permettent à la cel lule de réaliser l' ensemble des réactions chimiques

nécessaires à ses fonctions vitales, mais aussi à ses fonctions de cellule spécialisée au sein

de l'organisme. Exemples illustrant l'importance biologique des enzymes : document c page 125 Nathan Substrat (S) : mo lécule qui entre dans une r éaction pour y êtr e transfor mée grâce à l'ac tion catalytique d'une enzyme. Produit (P) : une ou plusieurs molécules qui résultent de la transformation du substrat à l'issue de la réaction

1 SP T1 - cours génétique. T. Leclerc

2

2. Mode d'action des enzymes

2.1 Les caractéristiques de la cinétique enzymatique

On appelle cinétique enzymatique, l'étude de la vitesse des réactions enzymatiques.

L'activité d'une enzyme est déterminée par la vitesse à laquelle elle catalyse une réaction

chimique. Cette vitesse peut être évaluée en quantité de substrat transformé ou de produit

apparu en fonction du temps. La vitesse est maximale au début de la réaction : on parle de vitesse initiale (V i ). La vitesse

initiale peut se déterminer graphiquement par le tracé de la tangente à l'origine de la courbe

de la quantité de substrat ou de produit en fonction du temps. Pour une con centration d 'enzyme donnée, le tracé de la courbe " vitesse initiale V i f(concentration en substrat S) » permet de constater l'existence d'un plateau qui témoigne de la saturation de l'enzyme par de fortes quantités de substrat : l'enzyme ne peut plus catalyser la tran sformation d'autres molécules de substrat mê me si la concentration de c elui-ci augmente, et sa vitesse initiale a atteint sa valeur maximale possible (Vmax).

Cf Activité C6_2 Étape1 et graphique V

i = f(S) page 132 Nathan

2.2 Le complexe enzyme-substrat

En règle générale, l'augmentation de la concentration en substrat ou de la concentration

d'enzymes en solution accélère la vitesse de la réaction enzymatique. Ces résultats traduisent

l'établissement d'un contact étroit entre l'enzyme et son substrat au cours de la réaction catalysée. Il y a formation d'un complexe transitoire entre l'enzyme et son substrat appelé complexe enzyme-substrat. La vitesse maximale (Vmax) de réaction correspond au moment où toutes les molécules d'enzymes sont engagées dans une réaction. Le complexe enzyme-substrat facilite la transformation du substrat en produit(s) ; c'est ce qui

accélère la réalisation de la réaction chimique et c'est ainsi que l'on peut expliquer l'efficacité

des enzymes comme catalyseurs.

A la fin de la réaction, l'enzyme libère le produit ou les produits de la réaction et retrouve son

état initial.

Une enzyme comme toute protéine est caractérisée par l'enchaînement des acides aminés

qui la constituent c'est-à-dire par sa séquence. Elle se replie spontanément dans l'espace et

adopte une conformation tridimensionnelle (structure spatiale) qui dépend de sa séquence. Dans cette structure spatiale se trouve une zone particulière appelée site actif dans laquelle se produit l'interaction avec le substrat.

E = enzyme ;

S= substrat ;

ES = complexe enzyme-substrat ;

P = produit(s)

1 SP T1 - cours génétique. T. Leclerc

3 Cf Activité C6_2 Étape 2 et Nathan page 129

Le site actif est formé par un ensemble d'acides aminés souvent éloignés dans la séquence

de l'enzyme mais qui se trouvent rapprochés suite au repliement de l'enzyme dans l'espace.

Le site actif comporte deux zones :

• une zone de liaison constituée d'acides aminés présentant une complémentarité de forme

avec le substrat (site de fixation du substrat) • une zone catalytique capable de transformer le substrat (site catalytique). Ainsi, la séquence d'une enzyme est fondamentale pour sa fonction puisqu'elle détermine la

forme de son site actif responsable de la double spécificité. Une modification de la séquence

d'acides aminés de l' enzyme due à une mutat ion peut modifier la struct ure spatial e de

l'enzyme : si le site actif est touché, l'activité de l'enzyme peut être diminuée ou nulle.

Schéma pour comprendre le site actif et la spécificité des enzymes page 133 Nathan Remarque : Certaines molécules ont une structure spatiale proche de celle d'un substrat : ce sont des analogues structuraux du substrat. Elles peuvent se fixer sur le site actif de l'enzyme

spécifique de ce substrat sans être transformées. Ces molécules sont appelées inhibiteurs

compétitifs : elles entrent en compétition avec le substrat pour la formation de complexes. La vitesse d'une réaction chimique diminue en présence d'un inhibiteur compétitif.

3. Expression génétique et contenu enzymatique des cellules

3.1 Les enzymes, des protéines issues de l'expression des gènes

Les enzymes présentes dans une cellule sont des protéines et résultent donc de l'expression

de l'information génétique. Ainsi, l'équipement enzymatique d'une cellule et les réact ions

chimiques possibles au sein de cette cellule dépendent de l'information génétique de cette cellule.

3.2 Les enzymes, marqueurs de la spécialisation cellulaire

Les cellules spécialisées d'un organisme pluricellulaire se distinguent par leur structure et par

leur fonction. Elles se différencient en n'exprimant qu'une partie de leurs gènes. En particulier,

elles ne produisent souvent pas les mêmes enzymes et ont des équipements enzymatiques différents qui déterminent leurs propriétés différentes. Les enzymes constituent donc des marqueurs moléculaires de la spécialisation cellulaire.

Un exemple avec le livre Nathan pages 130 - 131

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